[发明专利]一种分子组装类荧光探针及其制备方法与应用

权利要求书

1.分子组装类荧光探针在识别三甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸中的应用，所述分子组装类荧光探针其结构式分别如下：

CB[n](n＝6,7,8)

所述分子组装类荧光探针是通过H33258与CB[n]非共价键相互作用组装所得，所述的CB[n]为CB[6]、CB[7]或CB[8]这三种葫芦脲中的任意一种。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的分子组装类荧光探针的制备方法包括以下步骤：将H33258用水溶解，加入CB[n]，使H33258与CB[n]的摩尔比为1:1-2，搅拌1-4h后，旋转蒸发浓缩溶液，然后冷冻干燥得到所述分子组装类荧光探针。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

1)先配置浓度为3.0-10μM的荧光探针水溶液三份，在激发波长361nm条件下测其发射的荧光光谱，记录每一份荧光探针水溶液在400-650nm处的最大发射荧光强度I_0A，I_0B，I_0C；

2)往三份溶液中分别加入Fmoc保护的赖氨酸、二甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸和三甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸并混合均匀，每种类型的赖氨酸与所述荧光探针的摩尔比为0.3-0.5，在激发波长361nm条件下分别测三份溶液发射的荧光光谱，记录其在400-650nm处的荧光强度I_1A，I_1B，I_1C；

3)重复步骤2)n遍，使每次滴加的每种类型的赖氨酸的量与步骤2)相同，分别得到Fmoc保护的赖氨酸的荧光强度为I_2A至I_nA；二甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸的荧光强度为I_2B至I_nB；三甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸的荧光强度为I_2C至I_nC；

4)分别以荧光强度I_0X,…I_nX对应的赖氨酸类型的摩尔数与荧光探针的摩尔数之比为横坐标，以I_0X,…I_nX为纵坐标，做非线性拟合，即得到不同类型赖氨酸的荧光响应性曲线，其中X为A、B或C；若I_nX/I_0X≤0.55时，则说明溶液中包含有三甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述步骤1)中的分子组装荧光探针水溶液中加入Tris-HCl缓冲液调节pH＝2～7。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述Fmoc保护的赖氨酸为Lys、二甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸为Lys2，三甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸为Lys3，其结构式分别如下：

6.分子组装类荧光探针在识别包括有三甲基取代的Fmoc保护的赖氨酸的肽中的应用，所述分子组装类荧光探针其结构式分别如下：

CB[n](n＝6,7,8)

所述分子组装类荧光探针是通过H33258与CB[n]非共价键相互作用组装所得，所述的CB[n]为CB[6]、CB[7]或CB[8]这三种葫芦脲中的任意一种。