[发明专利]一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用

说明书

本发明适用于玉米育种技术领域，提供了一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用。利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，包括以下步骤：诱导剂选择；分区；诱导剂处理，包括以下步骤：各区在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入各区对应的诱导剂，然后套回纸袋；诱导剂筛选；最优诱导剂处理；收获。本发明通过对诱导剂的改进来解决试剂使用上的安全问题、花粉污染问题、操作效率问题，在保证安全的同时改进诱导效果，可加快玉米自交系的选育速度，且诱导率高，能保证种质资源遗传的稳定性。

技术领域

本发明属于玉米育种技术领域，尤其涉及一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用。

背景技术

玉米自交系选育的常规方法，完成一个自交系选育至少要经过7代以上的连续自交，对于遗传背景复杂的材料甚至要10代以上。为了加快选育速度，传统方法是采用诱导系进行诱导单倍体后加倍或利用秋水仙素等单一化学试剂诱导法。

但是诱导系诱导法存在单倍体籽粒难挑选和难加倍等问题，而利用秋水仙素等化学诱导法存在试剂致癌、诱导率偏低、花粉污染、操作速度缓慢以及效率低等问题。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法及应用，旨在解决背景技术中指出的现有技术存在的问题。

本发明实施例是这样实现的，一种利用混合试剂诱导玉米无融合生殖的育种方法，包括以下步骤：

诱导剂选择；

分区：田间按照诱导剂数量进行分区；

诱导剂处理，包括以下步骤：各区在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入各区对应的诱导剂，然后套回纸袋；

诱导剂筛选：收获后计算各区的诱导率，得到最优诱导剂；

最优诱导剂处理，包括以下步骤：在吐丝前对玉米雌穗严格套袋，吐丝后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝，当感觉到苞叶内花丝被掐断时，慢慢拔出花丝形成空腔，注入最优诱导剂，然后套回纸袋；

收获：成熟时收获果穗，获得基因型纯合的二倍体种子，经下一代鉴定得到纯系。

作为本发明实施例的另一种优选方案，诱导剂选择中：

复方A包括体积比为1：(1～1.2)的氟乐灵与青鲜素；

复方B包括体积比为1：(1～1.2)的氟乐灵与戊炔草胺；

复方C包括体积比为1：(1～1.2)：(1～1.2)的氟乐灵、青鲜素与戊炔草胺；

复方D包括体积比为1：(1～1.2)的青鲜素与戊炔草胺。

作为本发明实施例的另一种优选方案，设置两组对照，对照A包括氟乐灵，对照B包括秋水仙素。

作为本发明实施例的另一种优选方案，所述注入诱导剂的300～500倍液1.5～2.5ml。

作为本发明实施例的另一种优选方案，注入最优诱导剂的300～500倍液1.5～2.5ml。

作为本发明实施例的另一种优选方案，吐丝3～5天后，在苞叶顶端处用尖嘴钳夹切花丝。

作为本发明实施例的另一种优选方案，所述诱导糯质玉米的最优诱导剂为复方B，诱导率达61.4％。

作为本发明实施例的另一种优选方案，所述诱导普通玉米的最优诱导剂为复方D，诱导率达57.9％。

本发明实施例的另一目的在于提供一种所述的育种方法在糯质玉米育种中的应用。