[发明专利]一种同时测定豆芽中18种植物生长调节剂残留量的方法

说明书

本发明公开了一种同时测定豆芽中18种植物生长调节剂残留量的方法，其以豆芽为试验原料，样品经QuEChERS法处理后，用含5％乙酸‑乙腈(1:99，V/V)溶液提取，分散固相萃取吸附剂净化，甲醇溶剂转化定容后，经0.22μm滤膜过滤，选用Phenomenex H18色谱柱分离，通过保留时间匹配以及母离子、主要碎片离子的精确质量数进行定性分析，基质标准溶液外标法定量。在优化条件下，18种PGRs的保留时间在5.8‑11.7min之间。当质量浓度范围在0.005μg/mL‑0.05μg/mL时，各种PGRs的线性关系良好，相关系数(r)均≥0.9990，方法检出限(S/N＝3)为0.03μg/kg‑0.92μg/kg，定量限0.50μg/kg‑2.10μg/kg，在3个浓度水平上加标平均回收率为85％‑110％，相对标准偏差(n＝6)为2.8％‑7.5％。本方法操作简单、准确，可快速定性定量分析豆芽中18种PGRs的残留。

技术领域

本发明涉及豆芽中18种植物生长调节剂残留量的方法技术领域,更具体的说是涉及一种同时测定豆芽中18种植物生长调节剂残留量的方法。

背景技术

植物生长调节剂(Plant Growth Regulators，PGRs)是一类与植物激素具有相似生理和生物学效应的物质，也被称为植物天然激素或植物内源激素，可影响和有效调控植物的生长和发育，包括从细胞生长、分裂，到生根、发芽、开花、结实、成熟和脱落等一系列植物生命全过程。近年来，滥用及不当使用PGRs的现象时有发生，已影响到农产品的食用安全，对人民健康造成威胁[1-5]。原国家食品药品监督管理总局、原农业部以及原国家卫生和计划生育委员会发布的2015年11号公告中明令禁止在豆芽中使用6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸和赤霉素等生长调节剂类物质。因此，开展豆芽中植物生长调节剂残留的快速检测新技术研究，对保证食品安全、促进国民健康及社会经济发展都有十分重要的现实意义。

我国关于植物生长调节剂的多残留检测技术和有关限量标准的基础研究还处于起步阶段，多残留同时检测的国家标准尚未建立。目前，有关植物生长调节剂残留的检测方法主要有酶联免疫法(ELISA)[6]、气相色谱法(GC)[7]、气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)[8]、高效液相色谱法(HPLC)[9]、液相色谱-质谱法(LC-MS)和高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)[10]。GC和GC-MS/MS需要进行化学衍生，操作较为繁琐。ELISA灵敏度较低，难以实现痕量分析。HPLC的灵敏度较低，基质干扰影响较大，前处理复杂并且容易造成假阳性干扰。

发明内容

为了解决现有豆芽中植物生长调节剂残留量检测困难、灵敏度低等问题，本发明目的在于提供一种同时测定豆芽中18种植物生长调节剂残留量的方法，本方法采用5％乙酸-乙腈(1:99，V/V)作为提取溶剂，利用QuEChERS法对样品进行净化处理，通过优化色谱和质谱条件，建立了豆芽中18种PGRs的HPLC-MS/MS同时测定方法。该方法操作简单、灵敏度高、重现性好，精确度和准确度均满足方法学指标，可用于同时测定豆芽中18种PGRs残留量。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种同时测定豆芽中18种植物生长调节剂残留量的方法，18种植物生长调节剂为：氯吡脲、赤霉酸、环丙酸酰胺、脱落酸、吲哚丙酸、吲哚乙酸、对氯苯氧乙酸、噻苯隆、6-苄氨基嘌呤、4-碘苯氧基乙酸、抑芽唑、2,4-D、萘乙酸、烯效唑、抗倒胺、多效唑、吲哚丁酸、抗倒酯；C18、石墨化炭黑和N-丙基乙二胺均购自上海安谱公司；甲醇、甲酸、乙腈、NH4AC；无水硫酸镁、氯化钠、乙酸；其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)样品前处理：称取5.0g豆芽样品于离心管外管中，加入混合标准溶液，静置30min，加入10mL5％乙酸-乙腈(1:99，V/V)，加入萃取盐包及10颗锆珠，拧紧内管后放入自动QuEChERS前处理仪器中开始处理，经25min交替震荡离心后，准确吸取上清液1.0ml氮吹近干，用10％甲醇溶液定容，经0.22μm的有机微孔滤膜，滤液供HPLC-MS/MS测定；