[发明专利]基于硫化铋-溴化银异质结的光电化学传感器检测m6A的方法

说明书

本发明公开了基于花状Bi₂S₃的光电化学分析检测RNA中N⁶‑甲基腺嘌呤核糖核苷酸的方法，首先构建了检测N⁶‑甲基腺嘌呤核糖核苷酸的光电化学生物传感器，包括：电极，依次修饰在电极表面的花状Bi₂S₃、壳聚糖功能化的AgBr、4‑羧基苯硼酸、N⁶‑甲基腺嘌呤抗体、N⁶‑甲基腺嘌呤核糖核苷酸、CeO₂。本发明利用Bi₂S₃和AgBr形成的异质结材料的光电性能、抗体对抗原的特异性识别性能，以及CeO₂纳米材料作为信号放大，实现对RNA中N⁶‑甲基腺嘌呤核糖核苷酸的检测。本方法的检测方法简单，实现了仪器小型化，且易于操作，仅对ITO电极表面进行简单修饰，即可实现对RNA中N⁶‑甲基腺嘌呤核糖核苷酸的检测。

技术领域

本发明涉及光电化学分析技术领域，具体涉及一种基于花状Bi₂S₃-AgBr异质结的光电化学分析检测N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸的方法。

背景技术

RNA甲基化在表观遗传修饰领域中是非常重要的一部分。在RNA层面，N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸是RNA最主要的甲基化修饰形式。在哺乳动物中，N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸修饰的比例为0.1-0.4％，平均每条mRNA有3-5个N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸位点。 N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸在多种癌症类型中发挥重要作用，包括白血病、脑瘤、肝癌、乳腺癌和肺癌。研究表明，N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸的动态调控对基因表达的控制有显著影响。各种研究已经证实N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸的重要性，但是由于缺乏灵敏性和选择性高的分析方法，分析及评估N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸含量对其研究对象的影响方面受到很大影响，因此实现对N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸及其含量的检测具有重要意义。

目前针对N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸的相关检测方法主要包括薄层色谱法、气相色谱法、柱液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、毛细管电泳法。虽然上述方法对检测N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸(m⁶A)有很大的效果，但也存在一些不足之处，例如需要³²P标记或其他放射性元素标记，需要精密复杂的仪器，样品前处理繁琐，需要专业的操作人员，检测灵敏性较低和特异性不强等缺点。因此，建立简单、快捷、具有高灵敏性和高选择性的方法，用于N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸的检测，是至关重要的。

光电化学传感器是一种以光活性材料的光与电之间转化特性为基础而建立起来的新颖的分析检测技术，具有电化学分析和光化学分析的优点。其利用光激发光电活性材料，产生光生电子和空穴。而光生电子则被电极捕获，产生电流。其激发光源和检测信号是完全不同的两种形式，这样可以有效地降低背景信号的干扰，从而极大地提高分析检测的灵敏度，且具有检测速度快、易于微型化、操作简单、仪器简单和背景信号低等优点。目前尚未有一种基于花状Bi₂S₃-AgBr异质结的光电化学分析检测N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸的报道。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种检测N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸的光电化学传感器及其检测方法，实现了对N⁶-甲基腺嘌呤核糖核苷酸的高特异性和高灵敏性的检测。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：