[发明专利]一种猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒、制备方法及应用

权利要求书

1.一种猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒，其特征在于，是将目的抗原SP-E2和自组装分子的基因通过杆状病毒表达系统融合表达，形成SP-E2-mi3融合蛋白；然后进一步通过纳米组装，形成自组装蛋白纳米颗粒；所述目的抗原SP-E2和自组装分子的基因的编码序列如SEQID NO.1所示。

2.由权利要求1所述目的抗原SP-E2和自组装分子的基因编码的SP-E2-mi3融合蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.权利要求1所述猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）构建含有目标抗原SP-E2及自组装分子基因的穿梭质粒，将其转化DH10Bac感受态细胞；进一步使其发生转座，通过蓝白斑筛选获得重组杆粒；

（2）将重组杆粒转染昆虫细胞，获得杆状病毒，并将杆状病毒在昆虫细胞上进行传代；

（3）将P3代病毒液感染足量的昆虫细胞，纯化获得SP-E2-mi3融合蛋白；

（4）通过透析的方式，将SP-E2-mi3融合蛋白的溶液环境替换为纳米颗粒组装液，在4℃条件下进行纳米组装，并使用透射电镜确认纳米颗粒的形成。

4.利用权利要求1所述猪瘟病毒自组装蛋白纳米颗粒进一步制备猪瘟病毒自组装纳米颗粒疫苗的制备方法，其特征在于，是将SP-E2-mi3融合蛋白与Seppic 206水佐剂充分混合、乳化，制得纳米颗粒疫苗。

5.权利要求4所述方法制备获得的猪瘟病毒自组装纳米颗粒疫苗在制备防治猪瘟病毒感染药物中的应用。