[发明专利]鸡抗人胸苷激酶1-IgY多克隆抗体用于识别大分子复合物的用途

说明书

本发明涉及鸡抗人胸苷激酶1‑IgY多克隆抗体用于识别大分子复合物的用途，特别是识别人血清中TK1与蛋白质结合形成的大分子复合物的用途。通过利用鸡抗人胸苷激酶1‑IgY多克隆抗体，主要识别人血清中TK1与蛋白质结合形成的大分子复合物区域，其血清学检测试剂盒适用于筛查早期肿瘤风险进程和评估肿瘤患者预后的可信性。

技术领域

本发明属于抗体及应用领域，特别涉及鸡抗人胸苷激酶1-IgY多克隆抗体用于识别大分子复合物的用途，特别是识别人血清中TK1与蛋白质结合形成的大分子复合物的用途。

背景技术

人胸苷激酶(ATP:thymidine-5’phosphotransferase)简称人TK1，是一种嘧啶补救途径的酶，其催化脱氧胸苷（dThd）转化为脱氧胸苷单磷酸（dTMP），是唯一一种将胸苷引入DNA 合成途径的酶，因此在DNA 合成中具极为关键的酶之一。人TK1酶在细胞周期的G₁/G₀期活性和浓度低，但在S/G₂期升高。人TK1 在S 期晚期和G₂期的活性和浓度水平在不同类型细胞可能有所差异，如恶性或非恶性生长细胞 (Sherley JL., Kelly TJ. 1988）。其表达水平主要受翻译后调控机制的影响，它在有丝分裂期的降解，受控于泛素蛋白酶体途径介导的蛋白降解途（Ke PY., Chang ZF.,2004）。

肿瘤细胞是逃逸了细胞凋亡调控规律而导致异常分裂增殖的细胞。肿瘤细胞（包括S和G₂期的细胞）中的胸苷激酶1被释放至体液。因此，在细胞过度增生的情况下，血清TK1水平与肿瘤细胞增殖速度相关，并与肿瘤疾病的进程轻重程度，高水平TK1活性和浓度与肿瘤细胞增殖的高速度密切相关和肿瘤患者的生存和复发风险预后密切相关；但正常的细胞分裂是按照细胞凋亡调控规律进行，细胞内TK1在细胞分裂之前已经被降解，体内正常细胞增殖不会导致血清TK1水平的增加。（Skog S. 等, 2017）

在 1960 年初已提出检测血清TK活性方法是评估肿瘤细胞增殖度的唯一好的标志物（Clear J， 1967）。采用血清学检测TK1酶催化功能的活性方法是有效评估肿瘤患者的生存和复发风险预后，但一个建立血清学TK1浓度检测方法，真实的评估血清TK1水平与肿瘤细胞增殖速度相关的可信性，特别是用于体检筛查的真实早期肿瘤风险进程是一项艰难的研发工作。需要按照国际ROC分析曲线，达到下面积（AUC）达到 0.9 以上，误判率低的情况（Chen ZH. 等， 2011）。按照临床肿瘤预后评定 (REMARK，国际统一的指南) ，验证这华瑞同康的血清学TK1检测方法是有评估肿瘤患者生存和复发风险的可信性。

采用TK活性的方法已经使用于检测组织中细胞增殖度。检测肿瘤组织中细胞质的TK活性，已被报导作为一肿瘤细胞增殖度标记的好方法。从1692个乳腺癌患者乳腺癌组织分析TK活性检测显示，高TK1活性与短的生存率(Broet P. 等, 2000)。高TK1活性预示内分泌药物治疗患者预后差和短的生存率(Skog S. 等， 2017)。

由于检测TK活性的底物不是人TK1的专一性底物，与所有生物源如存在人体液中感染的细菌和病毒等共享同一底物，将可能导致血清中TK活性异常升高（Topolcan O. 等，2008），所以不适用于人群体检筛查。目前未有任何文献报告应用于人群体检筛查。

在肿瘤相关血清生物标记物中，TK1抗体检测血清中TK1的浓度是目前被认定的唯一评价肿瘤增殖速度的优选标志物。但是并非所有的TK1抗体都有适用于体检筛查中的早期筛查恶性肿瘤的风险的进程。

因此，在本领域中仍然需要一种具有上述的医学应用价值的特异抗体，才能对体检筛查中的早期恶性肿瘤风险进行评估。

发明内容