[发明专利]一种具有良好抗炎作用的构树提取物制备方法

说明书

本发明提供一种具有良好抗炎作用的构树提取物制备方法，包括以下步骤：S1.将构树样品与提取溶剂按照1：12～15的料液比混合，将由此形成的混合液的pH调节至酸性，提取溶剂由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照8～10:1的体积比混合而成；S2.向S1得到的混合液中加入果胶酶、纤维素酶中的至少一种酶，酶在混合溶液中的终含量为5×10⁴～9×10⁴U/kg；S3.水浴酶解1.8～3小时；S4.沸水浴灭酶；S5.收集提取液。本发明通过采用含有甲酰胺的提取溶剂和酶辅助降解的方式相结合，提取构树样品中的活性物质，能够获得对炎症细胞因子表现明显抑制的构树提取物。

技术领域

本发明属于天然产物领域，具体地，涉及一种具有良好抗炎作用的构树提取物制备方法。

背景技术

构树为落叶乔木的一种，广泛地分布于亚洲各地，其根和种子均可入药，树液可治皮肤病，具有很高的经济价值。近二十年来,国内外学者对构树的化学成分以及生物活性进行了大量的研究,从中分离出来了多种化学成分,主要有香豆素、三萜类、生物碱类、脂肪油以及大量的黄酮类和二苯丙烷类化合物。据广泛报道，构树中含有的多种构树醇能够抑制炎症细胞因子的表达，具有优异的抗氧化和抗炎抑菌作用，能够改善皮肤组织。

构树中的活性物质能否得到有效的利用，与其提取工艺息息相关。经典的构树属植物提取工艺使溶剂提取法，一般包括乙醇提取法、乙酸乙酯提取法、丙酮提取法、水提取法。然而，常用的溶剂提取工艺显示了所需溶剂量大、提取时间长、提取效率低下等缺陷，影响了提取物的后续利用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有良好抗炎作用的构树提取物制备方法，以提高具有能够抑制炎症细胞因子的表达的天然产物的提取效率。

根据本发明的一个方面，提供一种具有良好抗炎作用的构树提取物制备方法，包括以下步骤：S1.将构树样品与提取溶剂按照1：12～15的料液比混合，将由此形成的混合液的pH调节至酸性，提取溶剂由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照8～10:1的体积比混合而成；S2.向S1得到的混合液中加入果胶酶、纤维素酶中的至少一种酶，酶在混合溶液中的终含量为5×10⁴～9×10⁴U/kg；S3.水浴酶解1.8～3小时；S4.沸水浴灭酶；S5.收集提取液。

优选地，构树样品为构树根皮，并且，在S2中所添加的酶的纤维素酶。

优选地，在S2中，纤维素酶在混合溶液中的终含量为7.5×10⁴U/kg。

优选地，经过S1的操作所获得的混合溶液的pH为6～6.5。

优选地，在S3中，水浴温度为40～50℃。

优选地，提取溶剂由50％乙醇的水溶液与甲酰胺按照9.25:1的体积比混合而成。

优选地，在S1中，将构树样品与提取溶剂按照1：12～13的料液比混合。

在构树植株中，能够抑制炎症细胞因子表达的构树醇具有丰富的羰基和酚羟基，甲酰胺属于强极性的质子型溶剂，其中与N离子相连的质子具有较高的活性，其能够与构树醇形成氢键，促进构树醇的溶出。另外，本发明利用酶处理辅助构树样品的破壁，一方面能够缩短提取时间、降低提取温度，另一方面能够避免高温条件下甲酰胺的过早水解，由此能够保证提取的效率和产物的质量。在构树植株中，以构树根皮作为本方案中的构树样品，能够得到促生长因子分泌活性较高的提取物。针对构树根皮的结构，选择纤维素酶作为酶解处理的酶，能够有效地降解根皮细胞的细胞壁，促进构树醇的释放。进一步地，通过方案的优化设计，在本发明所选择的参数范围内，纤维素酶能够在含有甲酰胺的溶液环境中保持良好的活性，同时，反应过程也具有较高的可控性。

优选地，还包括S6：利用硅胶柱层析纯化提取液，所采用的洗脱剂由有机溶剂和水按照30～100:0～70的质量比复配而成，有机溶剂选自尿素、甲醇、丙酮中的至少一种。