[发明专利]一种稳定的液体谷胱甘肽还原酶校准品

说明书

本发明提供一种稳定的液体谷胱甘肽还原酶校准品，由以下成分组成：缓冲液、稳定剂、氯化钾、谷胱甘肽还原酶、表面活性剂、防腐剂。该校准品是稳定性强、均一性好、准确度高、有效期长的液体校准品。

技术领域

本发明涉及生化检测技术领域，特别是涉及一种稳定的液体谷胱甘肽还原酶校准品。

背景技术

谷胱甘肽还原酶(GR)是一种黄素蛋白氧化还原酶，GR是抗氧化损伤防御机制，由辅酶NADPH供氢，催化氧化型谷胱甘肽(GSSG)，生成还原型谷胱甘肽(GSH)。还原型谷胱甘肽(GSH)可使含巯基(-SH)的酶处于还原状态及活性状态，维持红细胞膜的完整性，防止血红蛋白氧化。GR在机体内活性强弱，依次为肝、肾、胰、心、甲状腺、红细胞和血浆。GR定位于微粒体及细胞液部分。因各脏器的组织细胞普遍含有GR，因而GR在机体氧化还原反应中起了举足轻重的地位。

在正常机体代谢过程中，机体存在有效的抗氧化防御系统，不断产生的氧自由基在抗氧化系统的作用下不断地被清除，从而维持生理水平的浓度。抗氧化系统包括细胞内抗氧化酶系统和非酶性的抗氧化剂，其中最主要的是谷胱甘肽抗氧化物酶系统。谷胱甘肽抗氧化物酶系统主要包括谷胱甘肽(GSH)，谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)，谷胱甘肽还原酶(GR)，谷胱甘肽巯基转移酶(GST)。谷胱甘肽是人类细胞中自然合成的，主要在肝内合成，由谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸组成的小分子三肽化合物，是细胞内主要的非蛋白质巯基化合物，在许多生命活动包括基因表达调控、酶活性和代谢调节、对细胞的保护、氨基酸转运、免疫功能调节等起着直接或间接的作用。在细胞内正常环境下以硫醇还原(GSH)存在，还原型是其主要的活性状态，大约占 95％；氧化型谷胱甘肽(GSSG)是非活性状态，约占1％。内源性GSH主要存在于胞浆内，GSH含有的巯基是其发挥主要作用的基团，由γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶催化合成。氧化应激或亲电化合物攻击可使细胞内GSH含量下降，或使其转变为双硫氧化性(GSSG)。GR是一种黄素蛋白氧化还原酶，以还原性辅酶Ⅱ为供氢体，能催化GSSG还原成GSH，对于维持生物体GSH和GSSG比的稳定、保持体内氧自由基平衡起着重要作用。

为了保证检测结果的准确性，谷胱甘肽还原酶(GR)校准品质控品发挥重要作用，而校准品质控品中谷胱甘肽还原酶 (GR)的稳定性成为重点，谷胱甘肽还原酶 (GR)酶稳定性受时间和贮存温度等多种因素的影响。目前市场上的谷胱甘肽还原酶校准品主要是冻干品，冻干过程中谷胱甘肽还原酶的分子结构容易遭到破坏，影响酶活，而且冻干品复溶比较麻烦，复溶过程中，水质差异及人为操作误差可能导致校准品复溶后的浓度与靶值有偏差，从而造成临床检测结果的不准确，复溶后的校准品不易保存，保存时间短。而液态酶在温度升高的情况下，如果酶不稳定会出现酶活降低，甚至会产生絮凝、沉淀及酸变的现象。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种稳定的谷胱甘肽还原酶校准品，该校准品是稳定性强、均一性好、准确度高、有效期长的液体校准品。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种稳定的液体谷胱甘肽还原酶校准品由以下成分组成：

缓冲液 0-200mM

稳定剂 1-20g/L

氯化钾 0.5-1 mM

谷胱甘肽还原酶 0-1KU

表面活性剂 0.1-10g/L

防腐剂 0.1-10g/L。

优选地，所述校准品的缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、甘氨酸缓冲液和4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液的任一种。

优选地，所述校准品的pH为6.0-8.0.