[发明专利]一种简便的慢性硬膜下血肿动物造模方法

说明书

本发明公开了一种简便的慢性硬膜下血肿动物造模方法。所述方法详细阐述了如何制作慢性硬膜下血肿动物模型，该方法解决了慢性硬膜下血肿造模动物选择、部位选择、血肿液选择及如何证实造模成功等一系列问题，本发明所述造模方法操作简单，易于掌握，对动物模型损伤较小，为慢性硬膜下血肿实验研究提供可靠资料。

技术领域

本发明涉及动物实验及医药研究领域，具体涉及一种简便的慢性硬膜下血肿动物造模方法。

背景技术

慢性硬膜下血肿(Chronic subdural hematoma，CSDH)是神经外科常见的疾病之一，好发于中老年人，手术是目前治疗该疾病最主要的方法，但术后3.7％-38％的复发率却成为影响预后的棘手问题。近年来，诸多学者对CSDH展开了相应研究，但研究报道大多为临床观察结果，对其基础性的深入探索因受制于既往动物模型的局限，始终未能广泛而有效地开展。

为建立用于实验的CSDH动物模型，1927年Putman人等以猫和狗作为实验动物采用开颅全血或自体血注射法制作CSDH的模型取得了成功，但由于操作复杂、费用昂贵等原因，后期亦未能得到推广应用。1972年watannabe等将血块和脑脊液的混合物置入到狗和猴子的硬膜下腔，制作SDH模型，直到上世纪八十年代，为了更好的推广和控制实验成本，CSDH的造模对象转移到了大鼠、小鼠上，Aikawa等人采用6-氨基酰胺小鼠腹腔注射的方法制备小鼠CSDH模型，2004年Eijkenboom采用开颅去骨瓣硬膜下注入自体血的方法制备了大鼠CSDH模型。权伟等改进了大鼠CSDH的模型，采用创新的速度梯度法+大鼠颅内多次注血法制备CSDH模型，刘建辉等采用骨瓣开颅、置管并多次注血的方法制备了CSDH模型。

至此，采用大鼠、小鼠等小动物建立CSDH模型被广泛应用于实验研究，但由于啮齿类动物颅内血肿吸收能力较强、吸收速度快，其可承受的、单次有限体积血肿形成后，第5～12天血肿即完全吸收，难以符合“血肿存留3周及以上”的人体CSDH血肿维持时间的标准，且不能满足药物在慢性期作用效果的观察，因此上述方法建立的CSDH模型在实验中再次被否定。

几年来，人们逐渐把造模动物选择的视线转向了家兔，研究发现家兔与人在生物学特性方面相似性较高，此外家兔方便操作，血液量较小鼠及大鼠充足，方便取血。刘建辉等以兔为对象，采用骨瓣开颅后置管，手术难度较大鼠明显降低，置管既避免了再次开颅又保证了后期的多次注血。为了手术操作的顺利，一般都取骨窗直径约为3mm，对大鼠而言面积约占颅骨顶叶的1/3，对兔面积只占顶叶约1/8-1/6，手术操作带来的影响远小于大鼠。在饲养和后续的实验中，对于留置管子的耐受性和耐受实验的能力较大鼠强，因此兔作为实验对象的优势更突出。

刘建辉等人的CSDH家兔模型中，采用的制作方式是磨开颅骨，形成约3mm×7mm大小骨窗，保留骨瓣并在其后部打一小孔，将硬膜外导管一端穿过小孔并用线捆法固定于骨瓣上。于硬膜上刺一小孔，显微镜下将导管置于硬膜下腔，同时骨瓣复位，逐层缝合颅顶肌层以固定骨瓣。我们研究发现，根据兔颅骨的厚度和大小，取骨瓣本省就不易，在骨瓣上打孔后仍保持骨瓣的完整后回纳整复困难增加，硬膜下的管头留的位置在回纳的骨瓣以下，固定的骨瓣不会像颅骨锁固定一样稳定，随着硬膜下注血是颅内压的增高，骨瓣是否会外突，并对实验产生的影响值得商榷。因此，在刘建辉等人的造模基础上，改进CSDH家兔造模方法，探索建立有效、且易复制的动物模型是进行CSDH深入研究的关键问题之一。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明旨在提供一种简便的慢性硬膜下血肿动物造模方法，该动物模型能最大程度模拟人体CSDH体内环境，同时解决动物选择、造模部位、血肿液选择及模型成功判定等一系列问题，且造模成本低廉、模型稳定，易于复制，为慢性硬膜下血肿进一步实验研究提供基础。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

本发明存在技术要点：

动物的选择