[发明专利]聚乙二醇化重组人促红素电荷异质性的检测方法

权利要求书

1.一种聚乙二醇化重组人促红素电荷异质性的检测方法，其特征在于，包括：(1)制备待检测的聚乙二醇重组人促红素样品；(2)配制预混液；(3)将待检测的聚乙二醇重组人促红素样品与预混液混合，采用全柱成像等电聚焦电泳系统进行分析检测得到等电聚焦谱图；(4)根据等电聚焦图谱中等电点标记物的迁移时间和pI值，确定待分析的蛋白样品各异构体的pI值；根据等电聚焦图谱的相关信息，确定待分析的蛋白样品各异构体的含量百分比；

步骤(1)中制备聚乙二醇重组人促红素样品包括将聚乙二醇重组人促红素样品进行超滤脱盐处理后再调整聚乙二醇重组人促红素样品中的蛋白浓度为1.6mg/mL；

所述的预混液各成分的最终含量为：两性电解质4v％、酸端等电点标记物0.8v％、碱端等电点标记物0.5v％、助溶剂16％，修饰及助分离剂0.35v％、占位剂10mM，所述占位剂为亚氨基二乙酸；

步骤(3)中采用全柱成像等电聚焦电泳系统进行分析检测的各项参数为：样品盘温度为10℃或15℃；预聚焦电压1500V，预聚焦时间1min；聚焦电压3000V，聚焦时间为12min。

2.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于，将Pharmalyte 2.5-5与Pharmalyte5-8按照3:1混合作为两性电解质。

3.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述酸端等电点标记物的pI值为3.38或3.59；所述碱端等电点标记物的pI值为5.85。

4.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述助溶剂为尿素；所述修饰及助分离剂为甲基纤维素。

5.按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)中将待检测的聚乙二醇重组人促红素样品与预混液按照4:1的体积比例进行混合。