[发明专利]一种样品中蛋白质的检测方法

说明书

本申请属于化学检测技术领域，具体涉及一种样品中蛋白质的检测方法。所述检测方法为采用浊度仪来测定；所述样品在酸性5‑磺基水杨酸水溶液中可溶解。该方法以浊度仪法测定蛋白质的含量，方法灵敏度高(检测限浓度3.351ng/ml、定量限浓度10.16ng/ml)，稳定性好(2小时至24小时内稳定)，准确度高，可准确的测定样品中蛋白质的量。

技术领域

本申请属于化学检测技术领域，具体涉及一种样品中蛋白质的检测方法。

背景技术

酶法或发酵法生产的物质中可能含有酶或微生物组织的残留，其主要成份为蛋白质，外源性蛋白质有可能导致人体过敏等不良反应，因此，为更好的对样品进行质量控制，需对蛋白质的量进行定量检测并控制，以保证样品的安全性。

专利CN102000139A中公开了艾迪注射制剂的检测方法，其中涉及到蛋白质检查，具体内容为：蛋白质：取冻干粉针10-20mg加注射用水1ml使溶解、或取输液4-10ml浓缩至1ml、或取水针剂1ml；加新配制的30％磺基水杨酸溶液1ml，混匀，放置5分钟，不得出现浑浊。

中国药典2020年版二部葡萄糖质量标准蛋白质检查项，具体内容为：取本品1.0g，加水10ml溶解后，加磺基水杨酸(1→5)3ml，不得发生沉淀。

可见，浊度法作为蛋白质的定性检查方法已经被应用，上述两种检测的共同点均为定性检查，无法准确检测蛋白质的具体含量，目前尚无采用浊度仪法作为定量测定蛋白质的方法。

知乎帖子《蛋白质定量分析的十种方法(下)》，发表日期2020-07-21，公开了蛋白质定量分析的方法，其中提到：“浊度法蛋白质定量分析：利用沉淀剂与蛋白质反应所产生的浊度与标准溶液浊度比较而定量测得未知蛋白浓度的定量分析法。磺基水杨酸和三氯化铁是常用的蛋白质沉淀剂。30g·L^-1磺基水杨酸作为沉淀剂可沉淀白蛋白、球蛋白及血红蛋白。50g·L^-1三氯乙酸蛋白作沉淀剂，可沉淀白蛋白和球蛋白。”该帖子提及浊度法可以作为蛋白质的定量分析方法，但未详细说明到底怎么样操作才能实现用浊度法定量检测蛋白质的量。通过浊度比较仅可得知蛋白浓度的大致范围，但无法准确测得蛋白质的含量，在蛋白质浓度较低或相近时，肉眼的分辨率将无法确定是否有浊度或浊度的差异，无法扣除非蛋白质浊度的干扰。因此该方法仍为定性检查方法，无法准确检测蛋白质的具体含量。

专利CN101865926A中记载到：现行药典(2010年版)控制中药注射剂蛋白含量的方法沿用了以前的磺基水杨酸比浊法，控制的蛋白质限量约为37～110μg/ml左右，低于此限量的蛋白药典方法很难检出。因此，蛋白含量低于37μg/ml的中药注射剂将被视为“合格”，这导致磺基水杨酸法应用范围受限。该专利记载了浊度法测定蛋白质的方法的缺陷，即最低限量浓度过高，蛋白含量低于37μg/ml的溶液采用浊度法无法检测。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本申请解决的技术问题在于提供一种样品中蛋白质的检测方法。本申请的检测方法能够实现样品中蛋白质的检测，且灵敏度高、准确性高与稳定性好。

有鉴于此，本申请提供了所述检测方法为浊度仪法，采用浊度仪来测定；所述样品需在酸性5-磺基水杨酸水溶液中可溶解。所述性5-磺基水杨酸水溶液浓度可以为10ppm5-磺基水杨酸溶液～5-磺基水杨酸饱和溶液。所述样品可以在酸性5-磺基水杨酸水溶液中可溶解的药品，药品辅料，食品等。

所述检测方法包括如下步骤：

(a)校正溶液的制备；

(b)供试品溶液的制备；

(c)标准品溶液的制备；

(d)测定法。