[发明专利]蛋白或肽与核酸共价连接的方法有效
| 申请号： | 202110186446.8 | 申请日： | 2021-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN112851765B | 公开（公告）日： | 2023-02-28 |
| 发明（设计）人： | 门冬;张先恩;周昆;曹姗姗;周娟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉病毒研究所 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;C12N15/11;C07K19/00 |
| 代理公司： | 北京布瑞知识产权代理有限公司 11505 | 代理人： | 孟潭 |
| 地址： | 430071 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 蛋白 核酸 共价 连接 方法 | ||
1.蛋白或肽与核酸共价连接的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）目标蛋白或肽与Trwc酶形成融合蛋白；
（2）融合蛋白中Trwc酶催化目标蛋白或肽与目标核酸共价连接；
所述Trwc酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Trwc酶识别的核酸序列为5’-n-TGCGTATTGTCT-n-3’，其中n代表零个、一个或多个碱基。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述n为0-30个碱基。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述目标蛋白或肽与Trwc酶直接连接或通过柔性连接肽连接形成融合蛋白。
5.一种蛋白核酸复合物，其特征在于，包括目标蛋白或肽、Trwc酶与目标核酸，所述目标蛋白或肽与目标核酸通过Trwc酶的催化连接；其中，所述目标蛋白或肽与Trwc酶形成融合蛋白；
所述Trwc酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
6.权利要求5所述复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
通过基因重组将目标蛋白与Trwc酶融合形成融合蛋白，并将所述融合蛋白与目标核酸混合，反应后获得蛋白核酸复合物。
7.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括目标蛋白或肽和Trwc酶；所述Trwc酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
8.根据权利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述目标蛋白或肽与Trwc酶直接连接或通过柔性连接肽连接。
9.Trwc酶在目标蛋白或肽与目标核酸连接中的用途，其特征在于，所述Trwc酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
10.一种Trwc酶，其特征在于，所述Trwc酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
11.编码权利要求10所述Trwc酶的基因。
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