[发明专利]检测成纤维细胞激活蛋白的化学发光探针及其合成方法与应用

权利要求书

1.一种检测成纤维细胞激活蛋白的化学发光探针，其特征在于，为一种金刚烷-二氧杂环丁烷类化学发光探针，具有以下结构通式：

其中，R为C₆H₅-CH₂O-CO- 或(CH₃)₃CO-CO-，当R为C₆H₅-CH₂O-CO- 时，命名为CFCL； 当R为(CH₃)₃CO-CO-时，命名为BFCL。

2.一种如权利要求1所述的检测成纤维细胞激活蛋白的化学发光探针的制备方法，其特征在于，具体步骤为：

（1）把金刚烷-二氧杂环丁烷衍生物即化合物7在缚酸剂和催化剂存在下，溶于无水惰性溶剂中，逐滴加入FAPα敏感基团——化合物d或d’的二氯甲烷溶液，进行高效液相色谱监测反应；所述催化剂为碘化钾、碘化钠或碘；

（2）反应结束后，采用薄层制备色谱纯化得到产物CFCL或BFCL，将其溶于二氯甲烷中，浓度范围为1-100 mg/mL；加入亚甲基蓝，CFCL或BFCL与亚甲基蓝的摩尔比范围为1:0.01-1，黄色光照下通入氧气，高效液相色谱监测反应；这里，敏感基团为化合物d，则得到产物为CFCL，敏感基团为化合物d’，则得到产物为BFCL；

（3）反应结束后，溶剂真空旋转蒸发去除，薄层制备色谱纯化，得到化合物CFCL或BFCL，两者均为浅黄色油状物；

其中，所述化合物7的结构通式如下：

所述敏感基团——化合物d、d’， 结构式如下：

。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述缚酸剂为碳酸钾或三乙胺。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述无水惰性溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、二氯甲烷。

5. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，化合物7与缚酸剂的摩尔比为1:（0.8 – 5），化合物7与催化剂的摩尔比为1:（0.01-1），化合物7与化合物d或d’的摩尔比为1:（1-5），化合物d或d’的二氯甲烷溶液的浓度为1-100 mg/mL，反应温度为0-30℃，反应时间为0.5-24h。

6.一种如权利要求1所述的化学发光探针在制备用于检测成纤维细胞激活蛋白（FAPα）试剂中的应用。

7. 根据权利要求6所述的应用，其特征在于，FAPα浓度范围为1.95-1000ng/mL ；探针的浓度为5 μM - 1 mM。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，用于测定细胞内、组织中或者血浆中的FAPα。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，用于动物体内FAPα的成像。

10.一种如权利要求1所述的化学发光探针在制备用于评价筛选FAPα抑制剂制剂中的应用。