[发明专利]一种猪伪狂犬病毒弱毒株冻干疫苗

说明书

本发明提供一种猪伪狂犬病毒弱毒株冻干疫苗，所述的猪伪狂犬病毒弱毒株冻干疫苗包含有抗原和疫苗冻干保护剂，其中抗原为TRZYT株弱毒株和QD株弱毒株；所述的TRZYT株弱毒株，是对保藏编号为CCTCCNO.17403的猪伪狂犬病病毒TRZYT株进行毒力基因缺失后，在细胞上进行拯救制备的；所述的QD株弱毒株，是保藏编号为CGMCC No.10266的猪伪狂犬病病毒株进行毒力基因缺失后，在细胞上进行拯救制备的。本发明所提供的猪伪狂犬病毒弱毒株疫苗所使用的抗原包含有猪伪狂犬病毒基因缺失弱毒株，通过水平传播感染在小鼠体连续传代，均未见毒力返强现象，遗传性稳定，符合猪伪狂犬病病毒缺失疫苗株无毒力返强的标准；且可有效预防猪伪狂犬病。

技术领域

本发明属于疫苗弱毒株制备技术领域，具体涉及一种猪伪狂犬病毒弱毒株冻干疫苗。

背景技术

猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)在分类学上属于疱疹病毒科α疱疹病毒亚科猪疱疹病毒I型，主要引起猪的伪狂犬病(Pseudorabies,PR)。猪是PRV的唯一宿主，PRV感染妊娠母猪后主要引起流产、产死胎和木乃伊胎等，感染后备母猪主要引起不育症，感染仔猪主要引起神经症状和死亡等。猪伪狂犬病的死亡率甚至高达100％，严重危害我国的养猪业。

该病目前尚无有效的药物能够对其进行治疗，主要依靠疫苗接种进行防控。近几十年来，养猪场主要依靠Bartha-K61疫苗进行防控，并取得了显著成效。但是自2011年以来，多省份发现免疫了Bartha-K61疫苗的猪场依然有感染PRV的猪出现，后经鉴定为变异的PRV强毒株。即现有Bartha-K61疫苗不能够有效防控PRV流行株导致的感染。因此，需要将分离的变异强毒株，采用自然致弱或基因工程手段致弱制备疫苗，防控PRV的感染。

发明内容

本发明的目的是提供一种猪伪狂犬病毒弱毒株冻干疫苗，所提供的猪伪狂犬病毒弱毒株疫苗所使用的抗原即包含有所筛选的PRV流行变异株的基因缺失弱毒株，还包含PRV的经典疫苗株，从而提供更广泛的免疫保护。

本发明所提供的猪伪狂犬病毒弱毒株冻干疫苗，包含有抗原和疫苗冻干保护剂，其中抗原为TRZYT株弱毒株和QD株弱毒株；

所述的TRZYT株弱毒株，是对猪伪狂犬病病毒TRZYT株进行毒力基因缺失后，在细胞上进行拯救制备的；

其中猪伪狂犬病病毒TRZYT株，于2019年3月15日保藏于位于北京市朝阳区北辰西路的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.17403；

所述的QD株弱毒株，是保藏编号为CGMCC No.10266的猪伪狂犬病病毒株进行毒力基因缺失后，在细胞上进行拯救制备的；

所述的QD株(疱疹病毒Ⅰ型Porcine herpesvirus TypeⅠ)已于2015年3月6日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.10266。

所述的毒力基因优选为gE和gI基因。

上述的疫苗，其抗原还包含有Bartha-K61株。

本发明所提供的猪伪狂犬病毒弱毒株疫苗还包含有活病毒疫苗用冻干保护剂；

所述的保护剂为蔗糖和明胶的水溶液，其在疫苗中的质量百分比终浓度分别为20％和4.8％。

本发明所提供的猪伪狂犬病毒弱毒株疫苗所使用的抗原包含有猪伪狂犬病毒基因缺失弱毒株，通过水平传播感染在小鼠体连续传代，均未见毒力返强现象，遗传性稳定，符合猪伪狂犬病病毒缺失疫苗株无毒力返强的标准；且可有效预防猪伪狂犬病。

附图说明

图1：病毒TRZYT株分离培养图，其中左图为正常Vero细胞，右图为接种病料出现细胞病变的细胞；