[发明专利]一种全氟化合物高通量靶标检测方法及应用在审
申请号: | 202110181360.6 | 申请日: | 2021-02-09 |
公开(公告)号: | CN112986427A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 吴洪强;刘瑜;范艳群;王剑锋;王云龙;杨磊;李春婷 | 申请(专利权)人: | 上海百趣生物医学科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86 |
代理公司: | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人: | 汤俊明 |
地址: | 201800 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氟化 合物高 通量 靶标 检测 方法 应用 | ||
本发明公开了一种全氟化合物高通量靶标检测方法及应用,包括以下步骤:S1样品预处理:将样品加入乙腈,涡旋混匀后静置,离心,上清液A经氮气吹干后,用提取液复溶,再次离心,得到上清液B;S2样品检测:制备标准溶液、绘制校准曲线、设置液相色谱和质谱的检测条件进行样品检测、分析检测结果。本发明样品预处理过程简单,所需的有机溶剂量少,并且本发明通过对液相色谱和质谱检测条件的设定,提高了全氟化合物的检测准确度和灵敏度,减少了试验误差,适合于血清中全氟化合物的检测。
技术领域
本发明涉及生物化学检测分析领域,具体涉及一种全氟化合物高通量靶标检测方法及应用。
背景技术
全氟化合物(PFCs)是一种应用范围广阔的人工合成化合物,已经在环境中被广泛检测到,因其具有的持久性和生物累积性,可以通过食物链等方式进入各种生物体内,在生物体内的蓄积水平高于已知的有机氯农药和二恶英等持久性有机污染物的数百倍至数千倍。全氟化合物还具有生殖毒性、诱变毒性、发育毒性、神经毒性、免疫毒性等多种毒性,是一类具有全身多脏器毒性的环境污染物。毒理学研究中可观察到的全氟化合物对生物体造成的毒性影响包括:抑制免疫系统,影响线粒体代谢,导致肝细胞损伤,生殖细胞受损,降低繁殖与生育能力,影响胎儿的晚期发育,基因表达的改变,干扰酶活性,破坏细胞膜结构,改变甲状腺功能等。因此,建立稳定、准确、快速的全氟化合物的分析检测方法十分重要。
中国专利《一种血清中全氟及多氟化合物的高通量快速检测方法》公开号:CN111624274A,公开了一种高通量检测血清中全氟及多氟化合物的方法,样品处理和检测都运用到96孔板,样品处理的步骤包括加入十二烷基硫酸钠进行预处理,水浴反应后离心取得上清液,在上清液中加入内标物和萃取剂,进行反应和超声萃取,样品处理的步骤复杂。
发明内容
为了解决上述技术问题,本发明第一个方面提供了一种全氟化合物高通量靶标检测方法,包括以下步骤:
S1样品预处理:将样品加入乙腈,涡旋混匀后静置,离心,上清液A经氮气吹干后,用提取液复溶,再次离心,得到上清液B。
S2样品检测:设置液相色谱和质谱的检测条件,进行样品的检测。
进一步地,所述步骤S1中样品与乙腈的体积比为1:(1-5)。
进一步地,所述步骤S1的提取液为甲醇、甲酸、乙腈、水中的一种或多种。
进一步地,所述步骤S2中液相色谱的流动相A为甲酸、甲酸水溶液、乙酸铵水溶液、邻苯二甲酸水溶液中的一种或多种。
进一步地,所述步骤S2中液相色谱的流动相B为乙腈。
进一步地,所述步骤S2中液相色谱的洗脱条件为梯度洗脱。
进一步地,所述步骤S2中液相色谱的洗脱条件为:
0.00min,流动相A为75%,流动相B为25%;
0.50min,流动相A为75%,流动相B为25%;
2.70min,流动相A为60%,流动相B为40%;
7.00min,流动相A为5%,流动相B为95%;
9.00min,流动相A为5%,流动相B为95%;
9.10min,流动相A为75%,流动相B为25%;
12.00min,流动相A为75%,流动相B为25%。
进一步地,所述步骤S2中质谱的仪器为三重四极杆质谱仪。
进一步地,所述质谱仪的分析采用多反应监测分析。
本发明的第二个方面提供了一种全氟化合物高通量靶标检测方法在血清中的应用。
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