[发明专利]一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法

说明书

本发明公开了一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法，包括APTT检测试剂和钙离子溶液，向pH为6.0‑8.5的缓冲体系中加入激活剂和螯合剂，并向得到的初始溶液中加入磷脂研磨至乳浊液，加入抗氧化剂、稳定剂和防腐剂搅拌均匀，定容后在37℃环境孵育1小时，过滤后得到APTT检测试剂；分别量取氯化钙和防腐剂，并加入缓冲液中搅拌至完全溶解，过滤得到氯化钙溶液，提供一种有效可靠、稳定性高的液体即用型活化部分凝血活酶时间的检测试剂。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂技术领域，尤其涉及一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法。

背景技术

机体的凝血与止血由血小板、凝血系统、纤溶系统、血管内皮系统之间的互相作用共同完成，其中凝血系统功能的状态直接影响人体生理健康。凝血过程复杂，涉及凝血因子、凝血酶、纤维蛋白原以及纤溶系统之间的调节与互作。根据凝血起始途径的不同，可将其分为内源性凝血系统与外源性凝血系统，相关的检查有凝血酶原时间(Prothrombintime，PT)、活化部分凝血活酶时间(Activated partial thromboplatin time，APTT)、凝血酶时间(thrombin time，TT)和纤维蛋白原(Fibrinogen，FIB)含量。

APTT检测试剂有冻干粉型和液体型两大类，冻干粉型试剂存在生产过程繁琐复杂、使用前需复溶、批间差大等问题。液体即用型APTT检测试剂虽然解决了以上问题，但却存在稳定性较差、易沉淀、不同激活剂制得试剂差异较大等不足。

发明内容

本发明的目的在于提供一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法，提供一种有效可靠、稳定性高的液体即用型活化部分凝血活酶时间的检测试剂。

为实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，所述活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒包括APTT检测试剂和钙离子溶液，所述APTT检测试剂包括激活剂0.01-1g/L、磷脂0.2-4g/L、10-100mM pH为6.0-8.5的缓冲体系、螯合剂10-500μM、抗氧化剂0.1-8％、稳定剂0.01-2％和防腐剂0.01-1％。

其中，所述激活剂为鞣花酸、硅藻土、高岭土、硅酸铝镁、纳米二氧化硅中的一种或多种。

其中，所述缓冲体系为4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液、3-(N-吗啡啉)丙磺酸缓冲液中的一种或多种。

其中，所述磷脂为磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、胆固醇、标本提取物中的一种或多种。

其中，所述螯合剂为氯化镁、氯化锌、氯化铁、氯化铜、氯化镍、氯化锰中的一种或多种。

其中，所述抗氧化剂为苯酚、抗坏血酸、茶多酚、甘氨酸、丁羟基茴香醚中的一种或多种。

第二方面，本发明提供了一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒的制备方法，应用于如第一方面所述的一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒，包括以下步骤：

向pH为6.0-8.5的缓冲体系中加入激活剂和螯合剂，并向得到的初始溶液中加入磷脂研磨至乳浊液，加入抗氧化剂、稳定剂和防腐剂搅拌均匀，定容后在37℃环境孵育1小时，过滤后得到APTT检测试剂；

分别量取氯化钙和防腐剂，并加入缓冲液中搅拌至完全溶解，过滤得到氯化钙溶液。

本发明的一种活化部分凝血活酶时间的检测试剂盒及制备方法，包括APTT检测试剂和钙离子溶液，向pH为6.0-8.5的缓冲体系中加入激活剂和螯合剂，并向得到的初始溶液中加入磷脂研磨至乳浊液，加入抗氧化剂、稳定剂和防腐剂搅拌均匀，定容后在37℃环境孵育1小时，过滤后得到APTT检测试剂；分别量取氯化钙和防腐剂，并加入缓冲液中搅拌至完全溶解，过滤得到氯化钙溶液，提供一种有效可靠、稳定性高的液体即用型活化部分凝血活酶时间的检测试剂。

附图说明