[发明专利]一种4-取代的吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了具有不同通式结构的4‑取代的吡啶并[2,3‑d]嘧啶‑7‑酮类化合物及其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、互变异构体、代谢产物或前药。本发明还公开了上述化合物作为NEDD8激活酶抑制剂的作用以及在制备用于治疗与NEDD8激活酶异常有关的疾病的药物中的用途。药理结果显示，该化合物具有良好的NEDD8抑制活性、抗肿瘤细胞增殖作用、促进肿瘤细胞凋亡作用。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种4-取代的吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮类化合物及其制备方法和应用。

背景技术

恶性肿瘤是一大类严重危害人类健康的常见多发疾病，其致死率高，仅次于心脑血管疾病。据世界卫生组织统计，2012年全世界约有820万人死于癌症，预计2030年因癌症死亡的人数将超过 1100万。中国是癌症发病率和病死率较高的国家，每年因此造成的经济损失高达数千亿元，并且随着人口老龄化、生态及生活环境的恶化，这种趋势更有可能加剧。因此，寻找治疗肿瘤的有效药物备受关注。

在真核细胞中，泛素蛋白酶体系统(UPS)负责蛋白质的降解，并在维持细胞内蛋白质动态平衡中担当重要角色。UPS的底物蛋白参与诸如细胞周期调节、细胞生长及增殖、信号传导、DNA修复及细胞凋亡信号传导过程。因此，UPS失调则会导致一些信号通路的异常激活或抑制，进而可能发展成为肿瘤或其他相关疾病。在UPS中，泛素首先由泛素激活酶(E1)ATP依赖性激活；其次通过转硫醇作用转移至泛素结合酶(E2)上，形成泛素-E2复合物；然后在泛素连接酶(E3)的作用下转移至待降解底物的赖氨酸残基上；最后底物蛋白被多个泛素修饰后，经蛋白酶体26S识别并降解。

泛素化过程的3个酶中，E3具有严格的底物特异性。目前已知RING-finger E3s(CRLs)是UPS E3 中最大的一个蛋白家族。它的底物蛋白包括很多与肿瘤相关的细胞调控蛋白,如Cdt-1,p27,pIκBα, NRF2,HIF-1α,Cyclin E,c-Jun,J-catenin,Cdc25A,Emi1,c-Myc,mTOR,BimEL等(GenesCancer. 2012,1:708–716)。经研究发现只有当CRLs被一个类泛素NEDD8修饰后才具有催化活性(Mol Cell Biol 2000,20:2326–2333)。

NEDD8是由81个氨基酸残基组成的蛋白质，与泛素有60％的一致性和80％同源性。它通过级联酶促反应特异性与待修饰蛋白结合的过程被称为Neddylation。该过程与UPS类似：首先，成熟的 NEDD8在NEDD8激活酶(E1)催化下，ATP依赖性激活；然后被转移至NEDD8结合酶(E2)；最后在NEDD8连接酶(E3)作用下，共价连接于被修饰蛋白上。NEDD8激活酶为NEDD8通路中的限速酶，因此可以通过调节NEDD8激活酶的活性，来调节NEDD8通路以及泛素蛋白酶体通路活性，从而达到治疗肿瘤的目的。由于NEDD8通路处于泛素蛋白酶体通路的上游，通过抑制NEDD8 激活酶，降低Neddylation活性，特异性下调泛素蛋白酶体通路中相关E3(CRLs)的活性，从而特异性减少细胞内与肿瘤相关蛋白的降解。

WO2007092213A2公开了第一个NEDD8激活酶抑制剂MLN4924的结构、制备方法及其作为抗肿瘤药物的应用。MLN4924目前正处于一期临床研究。MLN4924在NEDD8激活酶催化下，与 NEDD8形成NEDD8-MLN4924复合物，并由该复合物选择性抑制NEDD8激活酶活性，从而抑制NEDD8通路(Mol.Cell,2010,37:102-111)。除MLN4924以外，目前没有其他NEDD8激活酶抑制剂进入临床实验，更无NEDD8激活酶抑制剂药物上市，因此寻找及开发新型NEDD8激活酶抑制剂将对癌症治疗具有十分重要的意义。

发明内容

发明目的：本发明要解决的技术问题在于提出一种香豆素类化合物及其制备方法。

本发明还要解决的技术问题在于提供上述香豆素类化合物作为新的NEDD8激活酶抑制剂的应用。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：