[发明专利]一种黑皮鸡枞菌多糖ORP-1在肠道菌的增殖及黏附中的应用

说明书

本发明公开了一种黑皮鸡枞菌多糖ORP‑1在肠道菌的增殖及黏附中的应用，以所述黑皮鸡枞菌多糖ORP‑1制备肠道菌群调节剂。本发明通过体外实验探讨黑皮鸡枞菌多糖ORP‑1对肠道益生菌和肠道条件性病原菌的增殖、黏附的影响，同时利用Caco‑2细胞体外模拟建立经D‑gal诱导的小肠上皮细胞衰老模型，将双歧杆菌BB、嗜酸乳杆菌LA及大肠杆菌EC分别与Caco‑2细胞以及经D‑gal诱导的Caco‑2细胞共培养。结果发现，黑皮鸡枞菌多糖ORP‑1可以促进双歧杆菌BB和嗜酸乳杆菌LA的增殖及在D‑gal诱导的Caco‑2细胞上黏附与定植，抑制肠道条件性病原菌大肠杆菌EC的增殖及在在D‑gal诱导的Caco‑2细胞上黏附与定植。

技术领域

本发明属于肠道菌群调节剂技术领域，具体涉及一种黑皮鸡枞菌多糖ORP-1在肠道菌的增殖及黏附中的应用。

技术背景

益生菌是人体肠道内正常的生理性有益菌，双歧杆菌和嗜酸乳杆菌作为肠道内主要的益生菌，是通过在肠道内的黏附定植发挥益生作用。益生菌对肠道上皮细胞的黏附作用有利于其在肠道定植，从而恢复或增强肠道稳态，提高机体免疫力。而大肠杆菌作为人体肠道内条件性病原菌，异常时，大肠杆菌等条件性病原菌会大量增殖，损害肠道粘膜从而引发一些炎症，打破肠道稳态从而造成肠道紊乱。本发明通过间接和直接测定法来评价益生菌和条件性病原菌的黏附。间接测定法是指通过检测益生菌和条件性病原菌细胞壁的物理化学性质来推测黏附能力，比如疏水性、自聚集能力等。直接测定法是利用Caco-2细胞体外模拟建立经D-gal诱导的小肠上皮细胞衰老模型，通过革兰氏染色法直观地观察益生菌和条件性病原菌的黏附情况。

黑皮鸡枞菌多糖ORP-1是以黑皮鸡枞菌为原料制备的一种生物大分子。目前对于黑皮鸡枞菌多糖ORP-1的研究集中在结构和体外消化酵解的益生元活性上，而对于黑皮鸡枞菌多糖ORP-1促进肠道益生菌的黏附及抑制条件性病原菌的增殖和黏附尚未研究，同时在本研究中以已知益生元低聚果糖FOS作为阳性对照。

发明内容

本发明旨在提供一种黑皮鸡枞菌多糖ORP-1在肠道菌的增殖及黏附中的应用。本发明首次将黑皮鸡枞菌多糖经分离纯化得到的单一组分多糖ORP-1应用于肠道益生菌和肠道条件性病原菌致病菌的增殖与黏附实验，使得对黑皮鸡枞菌多糖的肠道菌群调节功能研究更具有靶向性。

所述黑皮鸡枞菌多糖ORP-1的组分构成以及制备方法为本课题组的前期研究工作，具体参见CN 110627919A公开的一种肠道益生元黑皮鸡枞菌多糖ORP-1及其制备方法和用途。

本发明黑皮鸡枞菌多糖ORP-1的应用，是以所述黑皮鸡枞菌多糖ORP-1制备肠道菌群调节剂。

所述肠道菌为肠道益生菌两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum,BB)、嗜酸乳杆菌(Lacrobacillus acidophilus,LA)及肠道条件性病原菌大肠杆菌(Escherichiacoli,EC)。

所述肠道菌群调节剂能够促进肠道益生菌双歧杆菌BB和嗜酸乳杆菌LA的增殖，提高双歧杆菌BB和嗜酸乳杆菌LA的疏水性及自聚集能力，提高双歧杆菌BB和嗜酸乳杆菌LA对D-gal诱导的Caco-2细胞的黏附率。

所述肠道菌群调节剂能够抑制肠道条件性病原菌大肠杆菌EC的增殖，降低大肠杆菌EC疏水性及自聚集能力，降低大肠杆菌EC对D-gal诱导的Caco-2细胞的黏附率。