[发明专利]一种钙网蛋白组合肽及其用途

说明书

本发明在于提供CRT组合肽及其用途，所述组合肽由CRT的优势表位组成，所述CRT优势表位，分别为：CRT aa.6‑14、CRT aa.1‑9、CRT aa.8‑16、CRT aa.13‑21、CRT aa.313‑321、CRT aa.195‑203。包含上述六条CRT优势表位的CRT组合肽的杀伤效果显著地高于包含上述三条、四条、五条CRT优势表位的CRT组合肽；发明包含所述六条优势表位的CRT组合肽、核酸或者药物组合肽可有效杀伤HPV，并对HPV引发的相关疾病方面有疗效。

技术领域

本发明涉及一种钙网蛋白(calreticulin，CRT)及其用途，具体地本发明涉及一种CRT组合肽及其该组合肽作为一种药物有效杀伤HPV，并对HPV引发的相关疾病有疗效。本发明还涉及所述CRT组合肽的优选剂量。

背景技术

人乳头瘤病毒(HPV)及相关宫颈癌在女性恶性肿瘤发病率中高居第二位，仅次于乳腺癌。根据宫颈癌病因学研究表明，99％的宫颈癌患者体内均检测到高危型HPVDNA的表达。全世界平均每年约有35万以上的患者死于宫颈癌，并且其数量呈上升趋势。在全球范围内，平均每一分钟新增一例宫颈癌患者，平均每两分钟便有一例患者死于宫颈癌。在我国，平均每年约有13万新患宫颈癌的女性，占世界宫颈癌新发病例总数的28％。

HPV是无包膜的双链闭环小型DNA病毒，其基因组编码E1、E2、E4、E5、E6、E7等六个早期蛋白和L1、L2两个晚期蛋白。其中E1、E2蛋白参与调控HPVDNA的复制和转录。E2蛋白还可以抑制编码E6和E7蛋白基因的表达。

根据已有数据显示，目前发现有100种以上不同类型的HPV。在多种类型的HPV中，高危型HPV包括但不局限于HPV16、18、31、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82的感染与宫颈癌以及宫颈癌前病变的发生密切相关。并且在高危型HPV亚型中，HPV16、HPV18是最常见的致癌类型，在我国的流行病学研究中显示，宫颈癌患者中HPV16以及HPV18的阳性率高达50％以上。

目前为止，在国际和国内市场上有2价、4价和9价HPV预防性疫苗。众所周知，预防性疫苗对已经感染了HPV的患者尤其对于长期持续感染HPV的患者而言，单纯的注射预防性HPV疫苗治疗效果甚微。并且，目前国际市场和国内市场还未有治疗已感染HPV而引发疾病的药品和治疗方法。

钙网蛋白(calreticulin，CRT)基因位于第19号染色体(p13.2-p13.3)，由9个外显子和8个内含子构成，其开放阅读框(ORF)长度为1254bp，编码由417个氨基酸组成的酸性蛋白质。目前发现钙网蛋白存在于除酵母外的所有细胞中。钙网蛋白的结构和功能区域由N区(aa 1-180)由反向平行的β-折叠和螺旋-转折-螺旋组成球形三维结构，所述区域是钙网蛋白于重金属(Zn²⁺)结合的区域。在体外所述区域还可以和其他内质网分子伴侣、细胞核受体的DNA结合域和核酸相互作用。钙网蛋白N区的另一功能是与P区一起维持其分子伴侣的功能；P区(aa 181-290)是一个富含脯氨酸的区域，它能与内质网腔的其他分子伴侣相互作用；C末端区(aa 291-400)带有高密度的负电荷，可高容量结合Ca²⁺，参与Ca²⁺在内质网的储存。C末端区存在KDEL内质网滞留信号，该信号与钙网蛋白在内质网中滞留密切相关。