[发明专利]一种基于多肽-锰-羰基复合物的CO释放分子的固相合成方法及其应用

说明书

本发明提供了一种基于多肽‑锰‑羰基复合物的CO释放分子的固相合成方法及其应用。本方法采用Fmoc固相多肽合成法，在需引入侧链修饰的位点使用侧链Alloc保护的赖氨酸，从C端到N端依次缩合Fmoc保护氨基酸，得到侧链带有Alloc保护的多肽氨基树脂；进行树脂上的Alloc基团脱除，暴露可用于修饰反应的自由氨基；在树脂上采用还原胺化反应，将树脂上多肽链上的自由氨基修饰为可进行化学配位的配体基团；加入五羰基溴化锰进行树脂上的化学配位；最后将目标多肽从树脂裂解下来并纯化，即可得到带有锰‑羰基配位的多肽。本发明有助于研究一氧化碳对特定部位的生理生化作用，同时为一氧化碳在相关疾病的治疗方面奠定良好基础。

技术领域

本发明涉及多肽-金属复合物合成制备技术领域，具体涉及一种基于多肽-锰-羰基复合物的CO释放分子的固相合成方法及其应用。

背景技术

一氧化碳(CO)因为具有与体内血红蛋白的强结合作用长期以来被认为是一种有毒气体。但于此同时，CO作为一种重要的气体分子，在哺乳动物体内发挥着信号传导，细胞保护等多种生理作用(R.Motterlini,Nat.Rev.Drug.Discov.,2010,9,728–743.)。为进一步探索CO在生命体系中的重要作用及临床医学的应用，首先需解决的关键问题之一即采用何种方式实现CO安全可控的定点运输。

使用一氧化碳释放分子(CORMs)是CO可控传递的可行方案之一。大部分的CORMs为金属-羰基复合物，CO与低氧化态的过度金属配位，经过一定刺激后可以释放出分子结构中的CO(R.Alberto,Dalton.Trans.,2007,1651–1660)。经过数年发展，根据激发CORMs释放CO方式，可将CORMs分为以下主要3类：1.配体交换引发CO释放型CORMs；2.酶诱导CO释放型CORMs(ET-CORMs)；3.光可控的光诱导CO释放型CORMs(PhotoCORMs)。PhotoCORMs由于其CO释放方式可控性更高的优点备受研究人员的关注，其中的代表是以锰-羰基(Mn(CO)₃)为基础的PhotoCORMs。但CORMs单体通常在水溶液中的溶解性较差，空气稳定性较差，生物相容性较差的缺点，这些缺点限制了单体CORMs的实际应用(R.D.Rimmer,Coord.Chem.Rev.,2012,256,1509–1519)。

采用CORMs与适合的载体构建得到的复合物可以解决CORMs上述的问题。用于构建CORMs复合物的载体通常包括多肽、高分子聚合物和纳米材料等。其中多肽与CORMs的复合物因具备更好的生物相容性而备受关注。除此之外，得益于一些特定种类多肽的特异靶向性，有望实现可控并定点的CO局部释放。

制备上述的多肽的CORMs复合物通常使用共价偶联的方法。通过化学逐步合成的方法，首先将带有金属-羰基的结构通过连接子与具有反应活性的官能团连接，接着反应活性官能团与多肽或蛋白原有或人为引入的反应位点反应，实现金属-羰基结构与多肽或蛋白的偶联。通用于金属-羰基结构与多肽或蛋白的偶联反应包括Sonogashira偶联，CuAAC催化的点击化学连接和肟的化学连接(M.Salmain,Eur.J.Inorg.Chem.,2020,2020,21–35)。这样的偶联反应通常需要在液相的环境中进行多步骤的合成，因此需要多步骤的纯化造成最终的产率较低。