[发明专利]一种基于磁分离同时检测多种目标物的生化分析方法有效
申请号: | 202110158962.X | 申请日: | 2021-02-05 |
公开(公告)号: | CN112964868B | 公开(公告)日: | 2022-06-28 |
发明(设计)人: | 陈翊平;周阳;王知龙;赵维琦;鲁鹏 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/58;G01N33/533 |
代理公司: | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人: | 徐绍新 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 分离 同时 检测 多种 目标 生化 分析 方法 | ||
1.一种基于磁分离同时检测多种目标物的生化分析方法,其特征在于包括以下步骤:
1)以不同粒径和不同颜色的高分子微球为信号探针,将多种目标物的生物识别分子分别与不同粒径和不同颜色的高分子微球偶联,每一种粒径和颜色对应一种目标物,同时将多种目标物对应的生物识别分子与纳米磁颗粒偶联,将高分子微球偶联物和纳米磁颗粒偶联物同时加入到待测样品进行生化反应,接着进行磁分离,收集含有反应复合物的分离液备用;
2)将含有反应复合物的分离液滴加到划分网格的载玻片上,涂匀后盖上玻片,光学显微镜对焦后对不同网格的计数区域进行分别拍照,并将高清图像传送至计算机;
3)计算机对高清图像中的微球粒径和颜色进行区分,并在Python机器视觉识别和深度学习的基础上得出反应复合物中每一种粒径和每一种颜色的高分子微球数量,最后根据每一种高分子微球的数量计算待测样品中不同种类目标物的含量,实现多种目标物的定量检测,
所述高分子微球的粒径为1~50 μm,所述纳米磁颗粒的粒径为100~500 nm;
所述不同粒径的高分子微球,它们的粒径倍数应≥2;
所述目标物包括病毒、生物标志物、抗生素分子、农药分子、兽药分子、生物毒素、细菌。
2.如权利要求1所述基于磁分离同时检测多种目标物的生化分析方法,其特征在于:所述不同颜色的高分子微球,它们的颜色分别为紫色、红色、橙色、黑色、蓝色、绿色、黄色或白色中的任一种。
3.如权利要求1所述基于磁分离同时检测多种目标物的生化分析方法,其特征在于:所述光学显微镜的种类为正置光学显微镜、倒置光学显微镜、荧光显微镜或金相显微镜,显微镜放大倍数为50~5000倍。
4.如权利要求1所述基于磁分离同时检测多种目标物的生化分析方法,其特征在于:所述生化反应包括免疫竞争反应、免疫夹心反应或DNA分子杂交反应。
5.如权利要求1所述基于磁分离同时检测多种目标物的生化分析方法,其特征在于:所述高分子微球为聚苯乙烯微球、二氧化硅微球、聚丁二烯微球、聚异戊二烯微球中的任一种。
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