[发明专利]一种重组烟曲霉抗原蛋白及其应用

说明书

本发明提供了一种重组烟曲霉抗原蛋白及其应用，所述重组烟曲霉抗原蛋白包括烟曲霉抗原Asp f1肽段、Asp f2肽段、Asp f3肽段、Asp f4肽段或Asp f6肽段的部分和/或全部氨基酸中的任意一种或至少两种的组合。本发明还提供了一种抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒及其制备方法。本发明所述重组烟曲霉抗原蛋白具有烟曲霉多个蛋白的特异性抗体结合位点，灵敏度高，特异性好；制备得到的抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒可以用于相关的检测中，耗时短，准确率高，平行性好，并且可以实现批量样本的自动化检测，排除了样本及人为操作对检测结果的影响，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于抗体检测技术领域，尤其涉及一种重组烟曲霉抗原蛋白及其应用。

背景技术

变应性支气管肺曲霉病(Allergic bronchopulmonary aspergillosis，ABPA)是烟曲霉致敏引起的一种变应性肺部疾病，临床表现为慢性支气管哮喘和反复出现的肺部阴影。研究显示ABPA在哮喘中所占比例为1.0％～3.5％，ABPA患者在连续就诊的哮喘患者中约占2.5％。除哮喘外，ABPA还可见于其他疾病，以肺囊性纤维化并发ABPA相对多见，病例汇总后患病率约为8.9％。

ABPA是一种对曲霉菌的超敏反应，在具有正常免疫能力个体的支气管被烟曲霉菌定植时发生，真菌孢子成分会导致IgE和IgG抗体形成。患者通常表现为支气管阻塞、气道炎症和黏液嵌塞，并可导致支气管扩张、纤维化和其他呼吸系统损害等病症，通常被诊断为过敏症、哮喘或囊性纤维化。对ABPA进行快速准确的诊断有利于疾病的控制与治疗。CN110616258A公开了一种用于检测rs4077515多态性位点的物质在评价或辅助评价ABPA中的应用，通过对ABPA患者的CARD9^S12N位点进行检测，分析其等位基因位点上A所占的百分比，进而评价或辅助评价待测个体患ABPA的可能性。然而这种方法仅适合应用于ABPA发病机理的相关研究中，可用于潜在患者的筛查与疾病预防中，并不适合应用于实际的临床检测中。

ABPA的误诊率较高，不及时治疗容易导致肺纤维化。因此，如何提供一种ABPA准确、快速的检测方法，为相关的诊断与治疗提供依据，已成为亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种重组烟曲霉抗原蛋白及其应用，所述重组烟曲霉抗原蛋白可以与相应的抗体特异性结合，提高了相关检测的敏感性和特异性；所述抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒准确性高，平行性好，具有广阔的应用前景。

为达此目的，本发明采用如下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种重组烟曲霉抗原蛋白，所述重组烟曲霉抗原蛋白包括烟曲霉抗原Asp f1肽段、Asp f2肽段、Asp f3肽段、Asp f4肽段或Asp f6肽段的部分和/或全部氨基酸中的任意一种或至少两种的组合。

本发明中，所述Asp f1、Asp f2、Asp f3、Asp f4和Asp f6为烟曲霉的特异性蛋白，每个肽段均具有5～9个抗体的特异性结合位点，还通过形成二硫键以及形成线性和构象结合位点等结构，进一步提高了与IgE结合的灵敏性与特异性，提高了相关检测的准确性。

优选地，所述Asp f1肽段包括SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。

优选地，所述Asp f2肽段包括SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。

优选地，所述Asp f3肽段包括SEQ ID No.3所示的氨基酸序列。

优选地，所述Asp f4肽段包括SEQ ID No.4所示的氨基酸序列。

优选地，所述Asp f6肽段包括SEQ ID No.5所示的氨基酸序列。

SEQ ID No.1：