[发明专利]抗人CD271的单克隆抗体及用途

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种分泌抗人CD271单克隆抗体的杂交瘤细胞株、其抗体及其应用。本发明的抗人CD271抗体具有高特异性和亲和力，可以用于制备CD271分子相关的检测试剂，或者制备CD271相关的生物技术药物，或者将其与磁性纳米材料偶联，制备免疫磁珠以分选肿瘤干细胞、间充质干细胞、神经细胞等，也可将其与其他靶点联用设计双特异性抗体等抗体偶联分子，用于某些组织修复疾病及神经系统或者肿瘤相关疾病的检测或治疗。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗人CD271的单克隆抗体及用途。

背景技术

CD271是一种低亲和力的神经生长因子受体(LNGFR)，属于肿瘤坏死因子受体超家族成 员，相对分子质量为75kD，又称为p75NTR，它包含3个区域：富含半胱氨酸的膜外区、跨膜区和155个氨基酸残基组成的胞内区。CD271不仅表达在神经系统，与神经细胞的发育、分化和存活密切相关，也是富集间充质干细胞比较合适的标志分子，与传统分选方法相比，具有特异性高、纯度高、集落形成能力强等优点。

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一类具有自我更新和多向分化潜能的成 体干细胞，在再生医学研究中具有广泛的应用前景。间充质干细胞进行的临床试验主要包括 组织损伤修复，如骨、软骨、关节损伤的修复，心脏、肝脏、脊髓损伤和神经系统疾病的治 疗。但MSC用于靶向组织修复一直受到干细胞在受损部位定植、增殖的限制。因此，在组 织损伤部位或者神经系统疾病相关的治疗中，清除或富集移植物中特定的细胞成为当前移植 领域中最为关键的问题。CD271、CD105、CD133等作为间充质干细胞的表面标记物，可以 有效分离或者富集间充质干细胞，在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为软骨、肌肉、 肌腱等，达到组织修复的目的。另一方面，CD271也是多种肿瘤干细胞(CSC)的标志物之 一。CD271作为MSC和CSC的表面标记分子，相对于CD44、CD105等分子具有对干细胞更好的特异性，其单克隆抗体不但可用于MSC的筛选和鉴定，也能用于抗肿瘤研究，具有 重要的研究和应用价值。但目前仍缺乏对间充质干细胞及肿瘤干细胞等具有广泛的识别能力的抗CD271单克隆抗体。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种抗人CD271的单克隆抗 体及用途。

天然CD271的胞外结构包括4个富含半胱氨酸的CRD结构(CRD1-4)以及一个连 接区域(stalk区)。在CD271表达后，CRD区域会被蛋白酶水解从而脱落，因此靶向 CRD区的抗体与CD271阳性细胞的结合会受到影响，甚至在细胞代谢的某个阶段无法 检测到CD271的表达。而靠近细胞膜的stalk区无糖基化、磷酸化修饰或高级空间结构， 结构稳定，识别此区域的抗体理论上具有较好的通用性。因此，为了获得能够稳定识别 人CD271的单克隆抗体，我们选取stalk区作为靶点开发新型的抗CD271单克隆抗体， 为该领域研究提供新的工具。

为了实现上述目的以及其他相关目的，本发明采用如下技术方案：

本发明第一方面提供一种抗分泌抗人CD271单克隆抗体的杂交瘤细胞株CD271T-2， 所述杂交瘤细胞株的保藏号为CGMCC 21494。保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。保藏日期为2021年1月25日。分 类命名为杂交瘤细胞株CD271T-2。

本发明第二方面提供一种抗人CD271单克隆抗体，抗人CD271单克隆抗体由CD271T-2杂交瘤细胞株分泌。

所述的抗人CD271单克隆抗体与人间充质干细胞有很好的结合亲和力。

可选的，所述述抗体是鼠源性单克隆抗体，属于IgM亚型。