[发明专利]三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因及其编码蛋白和应用

说明书

本发明属于分子生物学技术领域，具体的说是一种三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因及其编码蛋白和应用。三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因为序列表SEQ ID No.1中的碱基序列所示。本发明为三疣梭子蟹的病害防治、基因辅助选育奠定了基础，且在开发抗菌药物、菌凝集制剂、新型免疫活性剂、饲料添加剂生产等方面具有潜在的应用价值。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体的说是一种三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因及其编码蛋白和应用。

背景技术

纤维蛋白原相关蛋白(Fibrinogen-related proteins,FREP)是一类羧基端含有纤维蛋白原样(fibrinogen-like,FBG)结构域的模式识别受体。FREPs广泛存在脊椎和无脊椎动物中，是一个很大的超家族，包含纤维胶凝蛋白(ficolin)、细胞粘合素(tenascin)、纤维介素(fibroleukin)、外源凝聚素(tachylectins)等多种家族成员。

在脊椎动物中，纤维蛋白原主要参与了凝血过程。人的纤维蛋白原主要由肝细胞合成，是血浆中含量最高的凝血因子，也是凝血系统中的“核心”蛋白质。在无脊椎动物中，FREPs的氨基端结构域差异较大，通常含有一个或两个免疫球蛋白超家族结构域(immunoglobulin super family,IgSF)。FREPs的FBG结构域主要参与糖识别，其中含有特异性糖结合位点，能够特异性结合N-乙酰-D-半乳糖胺与N-乙酰-D-葡糖胺，在无脊椎动物先天性免疫防御中发挥重要作用。

三疣梭子蟹因其生长快、个体大、肉质鲜美，成为我国重要的海水养殖品种。近年来，随着养殖产业规模不断扩大，梭子蟹病害问题日趋严重，特别是弧菌病严重困扰梭子蟹养殖产业的健康发展。这就迫切需要从三疣梭子蟹自身的免疫防御因子入手研究其抗病机制和开发新型的抗菌药物进行免疫防治。目前关于三疣梭子蟹纤维蛋白相关蛋白的研究尚少，其对基因功能的影响尚不清楚。

发明内容

本发明旨在提供一种三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因及其编码蛋白和应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因，三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因为序列表SEQ ID No.1中的碱基序列所示。

所述PtFREP基因编码蛋白为序列表SEQ ID No.2中的氨基酸序列所示。

一种所述的三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因编码蛋白的应用，所述三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因编码蛋白的重组表达产物在制备抗菌药物、免疫活性剂、菌凝集制剂、菌结合制剂、饲料添加剂、防腐剂或保鲜剂中的应用。

所述三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因编码蛋白的重组表达产物在制备革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌的抗菌药物中的应用。

所述革兰氏阴性菌为副溶血弧菌、溶藻弧菌或铜绿假单胞菌；革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌或藤黄微球菌。

所述三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因编码蛋白的重组表达产物在用于制备革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌或真菌的凝集制剂或结合制剂中的应用。

进一步的说在10mM Ca²⁺存在下，重组蛋白PtFREP对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌或真菌具有明显的凝集效果。

所述革兰氏阴性菌为副溶血弧菌、溶藻弧菌或铜绿假单胞菌；革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌或藤黄微球菌；所述真菌为毕赤酵母菌。

所述三疣梭子蟹纤维蛋白原相关蛋白PtFREP基因编码蛋白的重组表达产物在用于制备细菌或酵母菌细胞壁成分的结合制剂。

所述细菌细胞壁的主要成分为脂多糖和肽聚糖；酵母菌细胞壁的主要成分为葡聚糖。