[发明专利]一株老鼠簕内生真菌Diaporthe goulteri及其代谢产物的应用

权利要求书

1.一株老鼠簕内生真菌Diaporthe goulteri，其特征在于，所述老鼠簕内生真菌Diaporthe goulteri是从老鼠簕根中分离得到的真菌，种名为Diaporthe goulteri，该真菌ITS区的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.根据权利要求1所述的老鼠簕内生真菌Diaporthe goulteri，其特征在于，所述老鼠簕内生真菌Diaporthe goulteri的分离纯化步骤如下：

（1）采集新鲜的老鼠簕根，洗去表面泥土和灰尘后，用无菌滤纸擦干；

（2）将以上老鼠簕根于超净工作台中按照以下程序进行操作：75%乙醇浸泡 1min→0.1%升汞清洗 1min→无菌水冲洗3遍→滤纸吸干水分→材料切割成约0.5×0.5cm小块，接种于PDA培养基，于25℃恒温培养箱静置培养4-7天，观察内生真菌的生长情况；

（3）挑取组织边缘菌丝尖端部分转入新的PDA培养基中进行纯化，经多次纯化后得到单一的菌落。

3.根据权利要求2所述的老鼠簕内生真菌Diaporthe goulteri，其特征在于，分离纯化得到的内生真菌Diaporthe goulteri菌株可保存在斜面PDA培养基中。

4.权利要求1-3任意一项所述的老鼠簕内生真菌Diaporthe goulteri经发酵后用乙酸乙酯提取得到的提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述提取物的制备方法如下：

（1）将内生真菌Diaporthe goulteri菌株接入到PDB培养基中，于150rpm、25℃条件下活化3天得到种子液；

（2）将种子液接种至大米固体培养基中，在室温下静置培养30天；

（3）往培养基中加入乙酸乙酯使其没过培养基平面，在室温下浸泡24小时后，利用超声辅助提取，过滤回收提取液，滤渣重复提取2次，合并滤液；

（4）滤液在40℃下减压浓缩得到粗提物，粗提物冻干后放置在-20℃下贮藏。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述大米固体培养基是由大米和蒸馏水以1:7的质量比混合后在121℃下灭菌30min制得的。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括卵巢癌、结肠癌、前列腺癌。