[发明专利]与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物、其获得方法及其用途

说明书

本发明涉及与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物、其获得方法及其用途。具体地，本发明涉及与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物的鉴定试剂在制备用于诊断受试者动脉粥样硬化的试剂中的用途，其中所述与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物选自表1和表2中的任一种或多种、或其组合。

技术领域

本发明涉及临床医学，具体而言涉及与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物。具体而言，本发明涉及利用动脉粥样硬化小鼠疾病模型和质谱分析蛋白组学技术获得的与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物及其用途。

背景技术

疾病生物标志物是与特殊病理过程相关的可测量的变化，用于诊断疾病、监测病程、预测疾病预后和评估治疗效果等。

尿液是理想的疾病标志物来源，可以用无创的方式大量获得；更重要的是尿液中没有内稳态机制的调控，所以尿液可以富集机体内排泄出的各种变化，从而在寻找早期生物标志物方面有巨大潜能(参见Gao Y.Urine--an untapped goldmine for biomarkerdiscovery.Sci China.Life Sci,2013,56(12):1145)。

尿液蛋白质组技术(urinary proteomics)作为一种快速发展的分析工具，旨在建立一种无创的“液体活检”(liquid biopsy)诊断方法。在尿液里挖掘疾病特异的生物标志物，部分替代器官穿刺病理检查已成为科学家及临床医生关注的重要研究方向，具有重要的科学意义和巨大的临床应用前景。

动脉粥样硬化(AS)是心脑血管疾病的主要病理基础(CVD)(参见Rahman,M.S.等人,Atherosclerosis.Adv Exp Med Biol,2017.1003:p.121-144.)，心脑血管疾病是当今世界第一大致死因素(参见Tabas,I.等人,Recent insights into the cellular biologyof atherosclerosis.J Cell Biol,2015.209(1):p.13-22.)。2015年有1700多万人死于心血管疾病，占全球所有死亡人数的31％(参见World HealthOrganization.Cardiovascular diseases(CVDs)Fact Sheet.2017.)。动脉粥样硬化的影响在晚期会更为显著并诱发心肌梗塞和中风等一系列致命后果，因此，在其早期阶段进行诊断或监测其进展程度有着重要的意义。

发明内容

鉴于本领域的上述需求，一方面，本发明提供了一种用于获得与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物的方法，所述方法包括以下步骤：

1)采用高脂饮食喂养1个月龄的ApoE-/-小鼠；

2)分别在步骤1)中的ApoE-/-小鼠第2、3、4、5和6个月龄时，过夜收集小鼠10小时尿液；

3)通过质谱分析，鉴定步骤2)中收集的小鼠尿液与对照小鼠尿液中的差异蛋白，所述对照小鼠与相应月龄的采用正常饮食喂养的C57BL/6小鼠；优选地，所述差异蛋白在相应月龄的ApoE-/-小鼠和对照小鼠之间的变化倍数≥1.5或≤0.67；和

4)将所获得的差异蛋白转化成人的同源蛋白，获得与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物。

另一方面，本发明提供了与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物的鉴定试剂在制备用于诊断受试者动脉粥样硬化的试剂中的用途，其中所述与动脉粥样硬化相关的尿液蛋白标志物选自表1和表2中的任一种或多种、或其组合。