[发明专利]痛风汤散抗高尿酸血症与痛风疾病的活性提取物制备与应用

说明书

本发明提供了痛风汤散抗高尿酸血症与痛风疾病活性提取物的制备方法，痛风汤散经乙醇回流提取、大孔树脂吸附解析获得本发明的痛风汤散活性提取物。本发明获得的活性提取物包含多酚类、黄酮类和生物碱类物质，其中，总多酚的UV含量大于50%、总黄酮的UV含量大于4%、总生物碱的UV含量大于0.4%。并且，活性提取物具有显著抑制黄嘌呤氧化酶活性、降低血清尿酸、尿素氮、肌酐、IL‑6和IL‑1β的水平、抑制痛风性关节炎的关节肿胀，其可单独或与其它药物配合开发成治疗高尿酸血症与痛风疾病的新型药物。

技术领域

本发明属于中药领域，涉及痛风汤散抗高尿酸血症与痛风疾病的活性提取物制备及其应用。

背景技术

体内嘌呤代谢紊乱可使尿酸生成量增多，导致体内尿酸水平异常增高，引发高尿酸血症（HUA）。长期的HUA可使尿酸盐结晶(MSU)沉积在关节或皮下等组织引起的炎性疾病，最终发展成痛风。临床以红、肿、热、痛反复发作及关节活动受限为特点，后期可致患者的关节活动产生障碍以及骨骼畸形。

据统计，全球痛风的发病率普遍为1～4％，西方一些国家已达到10％左右，我国为1～3％，且呈逐年上升的趋势。同时，自古以来称之为“富贵病”的痛风是糖尿病、慢性肾病、肥胖、高血压、肾结石、心梗、心衰和脑卒中等多种疾病的危险因素；美国国家健康与营养调查(NHANES)数据显示：在痛风患者中，69.1%患有高血压、62.9%患有肥胖症、33.1%患有2型糖尿病、53.7%患有高血脂症、47.4患有高胆固醇症、24%患有3期慢性肾病、7.4%患有心房颤动。在一大批痛风患者常年的随访中发现，血尿酸水平长期高于360μmol/L引发高血压、糖尿病、心血管疾病和尿路结石并发症的风险均显著增加；在由痛风导致死亡的患者中，50%以上带有心血管疾病，而且因心血管引发的死亡率与痛风严重程度成正相关。

目前，国内外临床对高尿酸血症与痛风疾病的治疗中均采用“降低血清尿酸、消炎止痛”的方案，药物以别嘌呤、苯溴马隆、非布司他及秋水仙碱等为主。这些药物虽然可以有效缓解患者的临床症状，但慢性痛风患者长期服用会产生严重过敏、肝损伤及免疫原性等副作用。

痛风类疾病为青藏高原的一种典型病种，藏医在对该类疾病的长期治疗过程中形成了一些经典方剂。其中，痛风汤散收载于《藏药标准》，由诃子、勒哲和渣浔膏3味原药材的粗粉混合组成，具有消炎止痛、干黄水的功效，用于痛风、下肢关节红肿疼痛等疾病。但是，至今对痛风汤散的抗高尿酸血症和痛风性疾病的活性成分及其制备均未见报道。

《藏药标准》中记载痛风汤散以药材原粉直接口服，这种服用方式降低了其活性成分的生物利用度，增大了其日服剂量，而且至今药效成分不明确，这些情况均在一定程度上限制了痛风汤散临床应用。

发明内容

针对目前痛风汤散以原粉入药、药效成分不明确、日服剂量大等问题，本发明采用药理活性跟踪的方法，对痛风汤散的不同提取物进行抗高尿酸血症与痛风疾病的药效评价，明确其抗高尿酸血症与痛风的活性提取物，并对活性提取物进行成分分析，明确了其化学成分组成。最终建立了一种化学成分明确、质量可控、药效作用有保障的痛风汤散抗高尿酸血症与痛风的活性提取物制备方法。

本发明的活性提取物以多酚类、生物碱和黄酮类物质为主，并且，其中总多酚的UV含量大于50%、总黄酮的UV含量大于4%、总生物碱的UV含量大于0.4%。

本发明的活性提取物通过以下步骤制备得到：

a）按5:4:2的质量比取诃子、勒哲和渣浔膏混合药材，用5~20倍（质量/体积）的60~90%的乙醇水加热回流提取2~4次，每次1-3小时，过滤，合并得提取液A；

b）提取液A经40~60℃减压浓缩至相对密度为1.01~1.07（60-70℃），真空干燥，即得痛风汤散醇提物B；

c）再将醇提物B用6-12倍（g/mL）水溶解，经10-20倍（g/mL）大孔树脂吸附，再依次用不同体积浓度的乙醇水溶液梯度洗脱，收集50 ~ 70%的乙醇水洗脱液，合并，真空干燥，即得痛风汤散活性提取物。