[发明专利]表达PD-L1分子的间充质干细胞来源外泌体及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 202110143129.8 | 申请日： | 2021-02-02 |
| 公开（公告）号： | CN112921003A | 公开（公告）日： | 2021-06-08 |
| 发明（设计）人： | 汪超;许方 | 申请（专利权）人： | 苏州大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;A61K35/28;A61K38/17;A61P29/00 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 215000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 pd l1 分子 间充质 干细胞 来源 外泌体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种表达PD-L1分子的间充质干细胞来源外泌体，其特征在于，采用病毒介导间充质干细胞表达PD-L1分子，表达PD-L1分子的间充质干细胞分泌得到所述的外泌体。
2.根据权利要求1所述的表达PD-L1分子的间充质干细胞来源外泌体，其特征在于，所述的外泌体粒径为80～120nm。
3.根据权利要求1所述的表达PD-L1分子的间充质干细胞来源外泌体，其特征在于，所述的外泌体通过静脉注射方式进行给药。
4.一种权利要求1～3任一项所述的表达PD-L1分子的间充质干细胞来源外泌体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
间充质干细胞培养；采用病毒介导间充质干细胞表达PD-L1分子；提取表达PD-L1分子的间充质干细胞分泌的外泌体。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的方法具体包括如下步骤：
(1)分离纯化得到间充质干细胞；
(2)利用载有PD-L1质粒的慢病毒转染间充质干细胞，并筛选获得表达PD-L1分子的间充质干细胞；
(3)将表达PD-L1分子的间充质干细胞置于无血清的低糖DMEM中培养20～30h，收集培养液上清，通过差速和高速离心获得表达PD-L1的间充质干细胞来源外泌体。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的差速和高速离心是依次进行如下离心：250～350g离心5～15min，1500～2500g离心5～15min，8000～12000g离心20～40min，80000～120000g离心60～80min。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，筛选是通过6～8μg/ml的嘌呤霉素进行筛选。
8.一种炎症治疗制剂，其特征在于，包括权利要求1～3任一项所述的表达PD-L1分子的间充质干细胞来源外泌体。
9.根据权利要求8所述的炎症治疗制剂，其特征在于，所述的炎症为慢性炎症和/或急性炎症。
10.根据权利要求8所述的炎症治疗制剂，其特征在于，炎症治疗制剂的给药方式为静脉注射。
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