[发明专利]通过抑制SD1基因的表达降低四倍体野生稻株高的方法有效

专利信息
申请号: 202110141716.3 申请日: 2021-02-02
公开(公告)号: CN112813067B 公开(公告)日: 2023-05-02
发明(设计)人: 李家洋;余泓;孟祥兵;张静昆;刘贵富;荆彦辉;陈明江 申请(专利权)人: 中国科学院遗传与发育生物学研究所
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/29;C12N15/82;C07K14/415;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 莫舒颖
地址: 100101 北京市朝阳区北辰*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 通过 抑制 sd1 基因 表达 降低 四倍体 野生 稻株高 方法
【权利要求书】:

1.通过抑制SD1基因的表达降低四倍体野生稻株高的方法,其特征在于,包括如下步骤:抑制受体四倍体野生稻中SD1基因的表达,得到株高矮于所述受体四倍体野生稻的目的四倍体野生稻;所述SD1基因为编码SD1蛋白的基因;所述蛋白质是如下A1)或A2)的蛋白质:

A1)氨基酸序列是序列表中SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的氨基酸序列的蛋白质;

A2)在A1)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

2.根据权利要求1所述的通过抑制SD1基因的表达降低四倍体野生稻株高的方法,其特征在于,所述SD1基因具体为如下E1或E2所示的DNA分子:

E1、编码链的编码序列是序列表中SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的DNA分子;

E2、核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的DNA分子。

3.根据权利要求2所述的通过抑制SD1基因的表达降低四倍体野生稻株高的方法,其特征在于,所述抑制SD1基因的表达通过CRISPR/Cas9方法实现,所述CRISPR/Cas9方法,其的靶序列为位于SD1基因中任一包括XXXNGG的核苷酸序列上的XXX序列;其中,XXX为所述的DNA分子序列中任意19-20 bp的核酸序列,N为A、T、G、C中的任意一个核苷酸。

4.根据权利要求3所述的通过抑制SD1基因的表达降低四倍体野生稻株高的方法,其特征在于,所述的靶序列为序列表中SEQ ID No.2第504位-第523位和SEQ ID No.2第627位-第646位所示的序列。

5.根据权利要求4所述的通过抑制SD1基因的表达降低四倍体野生稻株高的方法,其特征在于,所述CRISPR/Cas9系统包括如下1)或2):

1)sgRNA,所述sgRNA为sgRNA1和sgRNA2;

所述sgRNA1的靶点为SEQ ID No.2第504位-第523位所示;

所述sgRNA2的靶点为SEQ ID No.2第627位-第646位所示;

2)表达所述sgRNA的CRISPR/Cas9载体。

6.根据权利要求4所述的通过抑制SD1基因的表达降低四倍体野生稻株高的方法,其特征在于,所述目的四倍体野生稻为满足如下条件的四倍体野生稻:CC亚基因组和DD亚基因组在两个sgRNA的靶点区域发生突变。

7.四倍体野生稻矮化试剂,其特征在于,所述试剂的活性成分为抑制编码权利要求1中所述的SD1蛋白的基因的表达、降低权利要求1中所述的SD1蛋白的丰度、和/或敲除编码所述SD1蛋白的基因的物质。

8.根据权利要求7所述的四倍体野生稻矮化试剂,其特征在于,所述物质为CRISPR/Cas9系统;

所述CRISPR/Cas9系统包括如下1)或2):

1)sgRNA,所述sgRNA为sgRNA1和sgRNA2;

所述sgRNA1的靶点为SEQ ID No.2第504位-第523位所示;

所述sgRNA2的靶点为SEQ ID No.2第627位-第646位所示;

2)表达所述sgRNA的CRISPR/Cas9载体。

9.CRISPR/Cas9系统,其特征在于,所述CRISPR/Cas9系统包括如下1)或2):

1)sgRNA,所述sgRNA为sgRNA1和sgRNA2;

所述sgRNA1的靶点为SEQ ID No.2第504位-第523位所示;

所述sgRNA2的靶点为SEQ ID No.2第627位-第646位所示;

2)表达所述sgRNA的CRISPR/Cas9载体。

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