[发明专利]用于肺毛霉菌病致病菌检测的试剂盒及其使用方法和用途

权利要求书

1.一种用于肺毛霉菌病致病菌检测的试剂盒，其特征在于，包含能够以混合物形式存在的通用引物和特异性探针组，和用于构建反应液的缓冲液，其中，所述通用引物能够结合至米根霉、微小根毛霉、伞枝横梗霉、匍枝根霉和刺孢小克银汉霉菌的共有基因保守区；

所述通用引物的序列如SEQ ID NO:1和2所示，所述特异性探针组的探针序列如SEQ IDNO:5-9所示，且各探针的Tm值在60-65℃范围内，不同探针之间具有不同的荧光基团；

所述反应液为扩增反应的体系，其包含8-20mM Tris-HCl、40-60mM KCl、0.05-0.5%乙基苯基聚乙二醇和2-8mM MgSO₄，且pH值为8.5-9.0。

2.根据权利要求1所述的用于肺毛霉菌病致病菌检测的试剂盒，其特征在于，进一步包含内部质控和阳性质控。

3.根据权利要求2所述的用于肺毛霉菌病致病菌检测的试剂盒，其特征在于，进一步包含热启聚合酶。

4.一种根据权利要求1-3任一项所述的试剂盒的非诊断或治疗目的使用方法，其特征在于，包括使用所述通用引物和特异性探针组构建反应体系的步骤，和对所述反应体系进行PCR扩增的步骤。

5.根据权利要求4所述的使用方法，其特征在于，所述PCR扩增包括：

(1)预变性步骤，条件为2分钟、95℃；

(2)循环反应步骤，条件为15秒、94℃变性，60秒、55-58℃退火、延伸，共30-50个循环。

6.根据权利要求1-3任一项所述的试剂盒在用于制备肺毛霉菌病致病菌检测的医疗装置中的用途。