[发明专利]EGCG-CoPt NPs-Apt纳米粒子及其制备方法和应用

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种EGCG‑CoPtNPs‑Apt纳米粒子及其制备方法和应用。本发明通过以EGCG为模板，绿色合成EGCG‑CoPtNPs纳米粒子，接着在其表面修饰三阴乳腺癌细胞特异的核酸适配体AS1411，形成具有分子识别功能的复合型EGCG‑CoPtNPs‑Apt纳米粒子。本发明制备得到的EGCG‑CoPtNPs‑Apt纳米粒子利用纳米粒子和核酸适配体的双重靶向作用，能够显著降低三阴乳腺癌细胞MDA‑MB‑231细胞的增殖率及穿膜作用，同时降低肿瘤细胞转移因子MMP‑2、MMP‑9、EGFR和VASP的表达量，抑制肿瘤细胞转移，为临床三阴乳腺癌诊疗一体化奠定基础。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种EGCG-CoPt NPs-Apt纳米粒子及其制备方法和应用。

背景技术

近年来，由于各种社会因素的变化，乳腺癌的发病率呈现出逐年上升的趋势，目前已成为我国广大妇女身体健康的严重威胁，其复发转移性及远处转移特征是致死率居高不下的主要原因。三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer，TNBC)是指雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人类表皮生长因子受体2(HER2)均不表达的乳腺癌亚型。由于其侵袭性强、恶性程度高，且患此型乳腺癌的病人无法从内分泌治疗和抗HER2的靶向治疗中获益，因此临床上主要进行全身化疗，但这样获得的疗效往往较差，且带来很大的副作用。临床数据表明，三阴乳腺癌的发病率占乳腺癌的12.5％～16.3％，发病时大多数患者年龄偏小，但组织学级别较高，侵袭性强，无病生存期及总生存期较短，内分泌治疗及抗HER-2靶向治疗效果不佳，因此尚缺乏针对性治疗指导，多采取手术治疗、放射治疗和化疗等方式，但这些易对正常组织造成一定程度的损伤，因此发展新的诊断和治疗模式已迫不及待。

国内外大量研究表明天然产物提取物能有效遏制恶性肿瘤，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)作为茶多酚的重要组分，己经证实具有凋亡各种癌细胞的潜力，对癌细胞生长和增殖都有抑制作用。核酸适配体(nucleic acid aptamer，Apt)是近年来颇受关注的一类单链DNA或RNA的寡聚核苷酸，除了高稳定性、高特异性、高亲和力等特点外，还具有体积小、无免疫原毒性、合成方便、易量化、可以结合共轭物等特点。富含鸟苷酸的AS1411作为第一个进入临床研究的抗肿瘤核酸适配体，有研究表明其可以抑制多种肿瘤细胞的活性，比如三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)、前列腺癌细胞(DU145)和Hela细胞。

纳米材料由于颗粒小、相对表面积大、表面反应活性强等特性，与抗肿瘤药物结合后，可以兼具靶向性、滞留效应强、灭活速率慢及屏障穿透性好等优点，且肿瘤组织可被纳米材料特异性靶向，实现高效性、准确性的诊断和治疗，因此在肿瘤诊疗一体化的应用中占据先机。Kang等(Kang B,Austin LA,El-Sayed M A.Observing real-time molecularevent dynamics of apoptosis in living cancer cells using nuclear-targetedplasmonically enhanced Raman nanoprobes[J].ACS Nano,2014,8(5):4883-4892.)将抗肿瘤药物阿霉素通过pH敏感的腙键连接到金纳米材料上，在实现了靶向药物运输的同时也实现了在细胞水平上的药物释放的实时定量检测。Lu等(Lu Q,Dai X,Zhang P,etal.Fe₃O₄@Au composite magnetic nanoparticles modified with cetuximab fortargeted magneto-photothermal therapy of glioma cells[J].Int J Nanomedicine,2018,13(5):2491-2505.)将西妥昔单抗与Fe₃O₄@Au纳米颗粒相连接，再通过对肿瘤组织实施热刺激，从而升高caspase-3、caspase-8、caspase-9的表达，促进了肿瘤细胞凋亡。