[发明专利]一种利用CRISPR-Cas9修饰GmW1基因改变大豆花色的方法

权利要求书

1.降低蛋白W1活性或含量的物质或抑制编码所述蛋白W1的核酸分子表达的物质在在如下A-E中的应用；

A、改变植物花色；

B、筛选基因编辑植物；

C、用于可视化筛选其他外源基因基因编辑植物；

D、作为可视化报告标签；

E、制备可视化的基因编辑筛选系统；

所述蛋白W1由如下1)或2)或3)所示的核酸分子编码：

1)编码区为序列表中序列1所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子；

3)与1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：

所述物质为CRISPR/Cas9系统；

所述CRISPR/Cas9系统包括如下1)或2)：

1)sgRNA，所述sgRNA的靶点为序列1第633-655位；

2)表达所述sgRNA的CRISPR/Cas9载体。

3.一种培育花色改变目的植物的方法，为如下1)或2)或3)：

1)为包括如下步骤：先降低出发植物中蛋白W1活性或含量，得到转基因植株；培育所述转基因植株的后代，得到花色改变的目的植物；

2)为包括如下步骤：先抑制出发植物中编码蛋白W1的核酸分子的表达，得到转基因植株；培育所述转基因植株的后代，得到花色改变的目的植物；

3)为包括如下步骤：先对出发植物中编码所述蛋白W1的核酸分子进行基因编辑，使所述蛋白质翻译提前终止，得到转基因植株；培育所述转基因植株的后代，得到花色改变的目的植物；

所述蛋白W1由如下1)或2)或3)所示的核酸分子编码：

1)编码区为序列表中序列1所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子；

3)与1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：

所述降低出发植物植物中蛋白W1活性或含量、所述抑制出发植物植物中编码蛋白W1的核酸分子的表达或对出发植物植物中编码所述蛋白W1的核酸分子进行基因编辑，均通过如下实现：将CRISPR/Cas9系统导入所述目的植物中；

所述CRISPR/Cas9系统包括如下1)或2)：

1)sgRNA，所述sgRNA的靶点为序列1第633-655位；

2)表达所述sgRNA的CRISPR/Cas9载体。

5.一种通过花色鉴定基因编辑植物的方法，包括如下步骤：先对出发植物中编码所述蛋白W1的核酸分子进行基因编辑，得到基因编辑后植株，从所述基因编辑后植株的后代中筛选花色变化的植株，即为基因编辑植物；

所述蛋白W1由如下1)或2)或3)所示的核酸分子编码：

1)编码区为序列表中序列1所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子；

3)与1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子。

6.一种改变植物花色的物质，为降低出发植物中蛋白W1活性或含量的物质或抑制出发植物中编码所述蛋白W1的核酸分子表达的物质。