[发明专利]一种免疫荧光干片恢复剂及其应用有效
申请号: | 202110126830.9 | 申请日: | 2021-01-29 |
公开(公告)号: | CN112798378B | 公开(公告)日: | 2023-03-24 |
发明(设计)人: | 陈赛 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30;G01N1/34;G01N21/64;G01N33/533 |
代理公司: | 成都熠邦鼎立专利代理有限公司 51263 | 代理人: | 曾克 |
地址: | 610041 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 免疫 荧光 恢复 及其 应用 | ||
本发明公开了一种免疫荧光干片恢复剂及其应用,涉及免疫分析和生物技术应用领域,按重量份数计,由下列组分组成:4‑6份5%SDS,4.5‑5.5份0.5%Tween‑20,995‑1005份PBS溶液,免疫荧光干片恢复剂的应用,包括如下步骤:A1:用PBS溶液清洗干片的组织切片或细胞样本,清洗次数为1‑2次,每次5min;A2:在清洗后的组织切片或细胞样本上滴加或浸泡所述的免疫荧光干片恢复剂,摇床孵育20min,温度为室温,摇床转速为60‑80 rpm;A3:将孵育后的组织切片或细胞样本用PBS溶液清洗3次,每次5min,完成免疫荧光干片恢复。本发明可对免疫荧光干片后进行恢复,能增加免疫荧光实验的容错率,节约样本数量,节省实验时间。
技术领域
本发明涉及免疫分析和生物技术应用领域,具体涉及一种免疫荧光干片恢复剂及其应用。
背景技术
免疫荧光常常是一次性的,即一次实验后马上用荧光显微镜或者激光共聚焦观察。但在免疫荧光实验过程中,如果出现操作失误,比如,长时间未加溶液孵育,引起组织切片或者细胞样本干片,会增加免疫荧光的背景,影响最终的实验结果。现有技术只能通过用新的组织切片或者细胞样本重新实验来弥补失误,如果实验样品珍贵,例如,少见疾病的组织样本或者需要长时间造模得到的实验样本,常常没有多余样本用于犯错。对于免疫荧光实验条件,需要研究导致干片或者抗体特异性不佳时,常需要耗费部分实验样本来找到合适的实验条件。这就导致需要的样本量增加,延长实验时间。
发明内容
本发明针对现有技术存在的问题,提供了一种免疫荧光干片恢复剂及其应用,可对免疫荧光干片后进行恢复,能增加免疫荧光实验的容错率,节约样本数量,节省实验时间。
本发明通过下述技术方案实现:一种免疫荧光干片恢复剂,按重量份数计,由下列组分组成:4-6份5%SDS,4.5-5.5份0.5%Tween-20,995-1005份PBS溶液。
进一步,按重量份数计,由下列组分组成:4.59份5%SDS,5份0.5%Tween-20,1000份PBS溶液。
一种免疫荧光干片恢复剂的应用,包括如下步骤:
A1:用PBS溶液清洗干片的组织切片或细胞样本,清洗次数为1-2次,每次5min;
A2:在清洗后的组织切片或细胞样本上滴加或浸泡所述的免疫荧光干片恢复剂,摇床孵育20min,温度为室温,摇床转速为60-80 rpm;
A3:将孵育后的组织切片或细胞样本用PBS溶液清洗3次,每次5min,完成免疫荧光干片恢复。
上述至少包括以下优点:
1、本发明一种免疫荧光干片恢复剂及其应用,对封闭后干片、一抗孵育后干片、二抗孵育后干片均能进行恢复,且效果显著;
2、本发明一种免疫荧光干片恢复剂及其应用,可对免疫荧光干片后进行恢复,能增加免疫荧光实验的容错率,节约样本数量,节省实验时间;同时对于一些样本需要探索实验条件,致使样本干片,本发明恢复剂的应用也可满足需求;另外,一些抗体的特异性较差,也可通过本发明恢复剂的应用得到增强的抗体特异性。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本发明实施例的进一步理解,构成本申请的一部分,并不构成对本发明实施例的限定。在附图中:
图1为样本封闭后干片使用免疫荧光干片恢复剂的效果图;
图2为样本一抗孵育后干片使用免疫荧光干片恢复剂的效果图;
图3为样本二抗孵育后干片使用免疫荧光干片恢复剂的效果图。
具体实施方式
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