[发明专利]一株武夷菌素高产菌株、发酵方法及应用

说明书

本发明涉及一株武夷菌素高产菌株、发酵方法及应用。菌株的保藏号为CGMCC No.19060。该菌株的发酵方法，包括以下步骤：将菌株接种到培养基，发酵培养。该菌株可以用于制备武夷菌素，并且菌株的发酵液对多种致病菌具有很好的抑菌作用。本发明所述菌株具有生长快、产孢多、武夷菌素产量高、效价高且稳定等优点。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，尤其涉及一株武夷菌素高产菌株、发酵 方法及应用。

背景技术

武夷菌素是一种具有我国完全自主知识产权的低毒、高效、广谱、环保 的新型农用抗生素(化学结构式如式1所示)，由不吸水链霉菌武夷变种发 酵生产，对蔬菜和果树等多种作物的真菌性病害具有明显的防治效果，在农 业生产中得到了广泛的应用，创造了可观的经济、社会和生态效益。但是目 前在生产中面临菌种退化、发酵效价低、生产成本高的问题，制约了武夷菌 素的产业化。

高产菌株选育通常采用物理诱变(紫外、γ-射线、激光等)、化学诱 变(亚硝基胍、乙烯亚胺、硫酸二乙酯等)和基因工程育种等。其中，由于 有些微生物对传统的物理诱变方法非常敏感，致死效应远大于诱变效应；化 学诱变剂大都有毒，而且很多又是致癌物，其残留物、挥发物或者蒸汽等均 会对操作者的身体和周围环境造成危害；基因工程育种需要较长的周期和较 高的费用。

在前期武夷菌素高产菌株的选育过程中，采用物理、化学和高能粒子注 入相结合技术选育出高产菌株F64，发酵液效价提高150-200％，但是选育过 程复杂、周期漫长，且涉及到⁶⁰Co_γ射线、化学诱变剂等，具有一定的危险性； 采用基因工程技术选育出高产菌株W273，发酵液效价提高了132-317％，但 是过程复杂、周期漫长、费用昂贵。另外，菌株在生产过程中一直面临退化 的问题，因此迫切需要一种新的简便、高效、环保、安全的方法选育高产菌 株。

常压室温等离子体(Atmospheric Room Temperature Plasma，ARTP) 是近年来兴起的一种诱变育种新技术，是在常压下产生的具有高活性粒子的 等离子体射流，离子体射流的温度可以控制在25-40℃之间；ARTP可以对 生物胞内DNA物质造成显著损伤，并诱发细胞发生突变；与传统的诱变技术 相比较，ARTP诱变育种技术具有突变率高、突变位点丰富和操作简便安全等 优点，已经广泛用于细菌、放线菌、藻类、酵母、霉菌和大型真菌等领域。但是ARTP技术获得的突变菌株具有一定的随机性，并且突变后筛选工作量 大，突变随机性强，且容易产生回复突变、菌株不稳定等问题，因此，能否 获得正向突变的武夷菌素高产菌株也是未知的。

发明内容

鉴于现有技术所存在的问题，本发明提供一株武夷菌素高产菌株、发酵 方法及应用。该菌株具有生长快、产孢多、武夷菌素产量高、效价高且稳定 等优点。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

本发明提供一株武夷菌素高产菌株，保藏号为CGMCC No.19060。本发明 针对目前武夷菌素产生菌株退化、发酵效价低、生产成本高的问题，采用一 种新方法选育出一株武夷菌素高产菌株，在本发明实施例中将其命名为M28， 分类学名称为不吸水链霉菌武夷变种M28(英文名称:Streptomyces ahygroscopicus var.wuyiensis strain M28)，该菌株已于2019年12月 02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC No.19060，保藏地址为：中国北京。