[发明专利]一种β冠状病毒抗原、其制备方法和应用

权利要求书

1.一种β冠状病毒抗原，其特征在于：所述β冠状病毒选自：严重呼吸综合征冠状病毒、中东呼吸综合征冠状病毒和2019新型冠状病毒，所述β冠状病毒抗原具备免疫原性，其氨基酸序列包括：按照(A-B)-(A-B)样式排列的氨基酸序列或(A-B)-C-(A-B)样式排列的氨基酸序列，其中：A-B表示β冠状病毒的表面刺突蛋白的受体结合区的部分氨基酸序列或全部氨基酸序列，其满足以下条件：1）落在中东呼吸综合征冠状病毒的表面刺突蛋白的受体结合区的从E367位点至C603位点的区域或其它β冠状病毒的对应区域之内，并且，2）包含中东呼吸综合征冠状病毒的表面刺突蛋白的受体结合区的从E367位点至D593位点的区域或其它β冠状病毒的对应区域；C表示连接氨基酸序列(GGS)_n，其中n表示GGS的个数，n为≥1的整数；所述β冠状病毒抗原为单链二聚体结构。

2.根据权利要求1所述的β冠状病毒抗原，其特征在于，所述连接氨基酸序列(GGS)_n连接序列中，n为选自1-10的整数。

3.根据权利要求1所述的β冠状病毒抗原，其特征在于，所述连接氨基酸序列(GGS)_n连接序列中，n为选自1-5的整数。

4.一种制备权利要求1-3之一所述的β冠状病毒抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：在编码权利要求1-3之一所述的β冠状病毒抗原的核苷酸序列的5’端加入编码信号肽的序列，3’端加上终止密码子，进行克隆表达，筛选正确的重组子，然后转染表达系统的细胞进行表达，表达后收集细胞上清，纯化得到β冠状病毒抗原。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述表达系统的细胞包括为哺乳动物细胞、昆虫细胞、酵母细胞或细菌细胞。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述哺乳动物细胞包括293T细胞或CHO细胞，所述细菌细胞包括大肠杆菌细胞。

7.一种编码权利要求1-3之一所述的β冠状病毒抗原的核苷酸。

8.一种包括权利要求7所述的核苷酸的重组载体。

9.一种包括权利要求8所述的重组载体的表达系统细胞。

10.一种权利要求1-3之一所述的β冠状病毒抗原、权利要求7所述的核苷酸、权利要求8所述的重组载体、权利要求9所述的表达系统细胞在制备β冠状病毒疫苗中的应用。

11.一种β冠状病毒疫苗，其特征在于，包括权利要求1-3之一所述的β冠状病毒抗原和佐剂。

12.根据权利要求11所述的β冠状病毒疫苗，其特征在于，所述佐剂选自铝佐剂、MF59佐剂或类MF59佐剂。

13.一种β冠状病毒DNA疫苗，其特征在于，包括有：包含编码权利要求1-3之一所述的β冠状病毒抗原的DNA序列的重组载体。

14.一种β冠状病毒mRNA疫苗，其特征在于，包括有：包含编码权利要求1-3之一所述的β冠状病毒抗原的mRNA序列的重组载体。

15.一种β冠状病毒病毒载体疫苗，其特征在于，包括有：包含编码权利要求1-3之一所述的β冠状病毒抗原的核苷酸序列的重组病毒载体。

16.根据权利要求15所述的β冠状病毒病毒载体疫苗，其特征在于，病毒载体选自以下的一种或几种：腺病毒载体、痘病毒载体、流感病毒载体、腺相关病毒载体。