[发明专利]牛白藤总环烯醚萜提取物、提取纯化方法及其应用

说明书

本发明提供了一种牛白藤总环烯醚萜提取物、提取纯化方法及其应用，所述提取纯化方法依次包括如下步骤：将牛白藤加入乙醇，然后加入壳聚糖，调节pH值为5.8‑6.5，提取0.5‑8小时，过滤，得到提取液和滤渣，再将滤渣加热回流提取，反复2‑4次，合并提取液，浓缩，得干膏提取物；然后将干膏提取物净化、提纯，得到牛白藤总环烯醚萜提取物。该提取方法提取率高，纯化效果好，并且得到的牛白藤总环烯醚萜提取物具有抗食管癌的作用。

技术领域

本发明涉及一种从中药中提取活性成分及其制备方法和应用，特别涉及一种具有抗肿瘤作用的以牛白藤为原料的总环烯醚萜提取物、提取纯化方法及其应用。

背景技术

环烯醚萜类化合物是天然产物中的一个大类，包含近千种化合物，其中90％以上为环烯醚萜苷类。从结构母核上可根据其是否具有完整的环戊烷结构单元分为环戊烷环烯醚萜和裂环环烯醚萜两种，其中环戊烷环烯醚萜类包括栀子苷、马钱苷、鸡屎藤苷、桃叶珊瑚苷、穗花牡荆苷等，裂环环烯醚萜包括獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、当药苷、胡黄连苷、莫诺苷等。

它们广泛存在多种中药材里，如栀子、胡黄连、杜仲、筋骨草、金银花等，是许多常见中成药，如栀子金花丸、连花清瘟胶囊、清肺抑火片、九味獐牙菜丸、九分散等的药效成分之一。

常用中药牛白藤也含有环烯醚萜类化合物，牛白藤是指茜草科耳草属植物牛白藤的干燥藤茎叶，又名毛鸡屎藤、甜茶、排骨连等，主产于广东、广西、云南、贵州、福建和台湾等地区。

环烯醚萜化合物具有抗肿瘤、抗炎等多种生物活性，有极大的研究价值，近年来受到越来越多的关注。

提取分离环烯醚萜类化合物多采用溶剂法提取，常选用的溶剂为水、甲醇、乙醇、稀丙酮及乙酸乙酯等。

现有技术中环烯醚萜类化合物的提取分离方法提取率偏低，提纯效果较差。

发明内容

本发明的主要目的是克服现有技术的缺点，提供一种牛白藤总环烯醚萜提取物、提取纯化方法及其应用。该方法牛白藤总环烯醚萜提取物的提取率高，纯化效果好。

为实现上述目的，第一方面，本发明提出了一种牛白藤总环烯醚萜提取物的提取纯化方法，依次包括如下步骤：

(1)将牛白藤加入乙醇，然后加入壳聚糖，调节pH值为5.8-6.5，提取0.5-8小时，过滤，得到提取液和滤渣，然后再将滤渣加热回流提取，可以反复2-4次，合并提取液，浓缩，得干膏提取物。

优选地，所述牛白藤为牛白藤粉末。

优选地，所述乙醇的重量百分比浓度为55-65％，所述牛白藤粉末与乙醇的重量比为1:(8-10)。

优选地，牛白藤与壳聚糖的重量比为(10-20):1，提取过程中壳聚糖可以使牛白藤中的环烯醚萜类化合物更好地释放出来，提高收率。

在提取过程中，壳聚糖在促进环烯醚萜类化合物释放的同时，还会吸附部分环烯醚萜类化合物，如果壳聚糖的用量过高，在提取过程中壳聚糖的吸附作用超过其促进释放作用，过滤后提取液中总环烯醚萜提取物的收率反而降低；如果壳聚糖的用量过少，起不到相应的作用。

优选地，采用超声波提取，提取时间为0.5-0.6小时。

优选地，调节pH值时采用盐酸调节。

提取过程中pH值会影响环烯醚萜类化合物的溶解性，也影响壳聚糖对环烯醚萜类化合物的促进释放作用，在本发明牛白藤总环烯醚萜提取物的提取方法中，如果pH值低于5.8，或者高于6.5，收率均会降低，跟传统提取方法的收率相当。

优选地，本发明牛白藤总环烯醚萜提取物的提取纯化方法，还包括如下步骤：

(2)取步骤(1)制备的干膏提取物用热水溶解，过滤，制备成牛白藤环烯醚萜粗提液，采用萃取方法进行净化，萃取时采用固相萃取柱。