[发明专利]代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法及其产物分析方法

权利要求书

1.一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)、取适量的塑料制品，剪成小块；

步骤(2)、置于球磨罐中，在球磨机中真空研磨；

步骤(3)、称取研磨后的塑料样品用水分散并配制一定浓度的分散液；

步骤(4)、将微纳塑料分散液与代谢酶溶液混合，保证代谢酶与微纳塑料混合的质量比范围为0.00000001-10000，将混合液置于涡旋振荡器混匀；其中，所述代谢酶包括谷胱甘肽S-转移酶；

步骤(5)、将混合液置于隔水式培养箱中孵育。

2.根据权利要求1所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，塑料在球磨机中研磨时间设置为6h-24h。

3.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，步骤(4)中的微纳塑料可通过对球磨后的塑料制品进行浮选得到，浮选过程需加入表面活性剂并进行机械搅拌。

4.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，孵育时间设置为0-14天，微纳塑料分散液浓度范围为0.0000001-1000μg/mL。

5.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，步骤(4)中所述谷胱甘肽S-转移酶来自动物或植物。

6.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，步骤(5)中孵育环境适用于黑暗或光照环境，温度适用范围为15℃-37℃。

7.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，步骤(5)孵育后的微纳塑料颗粒的降解率为50％-100％。

8.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，步骤(5)孵育后得到的微纳塑料颗粒特征吸收和降解产物的质谱范围在0～2000m/z内。

9.根据权利要求8所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，步骤(5)孵育后得到的微纳塑料颗粒特征吸收和降解产物的质谱范围在1000m/z以下的小分子区域。

10.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，步骤(5)孵育后得到微纳塑料颗粒的降解路径包括氧化路径和氮化路径。

11.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法，其特征在于，步骤(1)中的塑料制品可为环境或生物样本中的塑料制品，表征技术包括形态学表征和质谱的分子表征。

12.根据权利要求1或2所述的一种代谢酶诱导微纳塑料颗粒生物降解方法的产物分析方法，其特征在于，包括：

步骤(6)、取孵育一定时间的混合液滴加在MTP 384不锈钢非抛光靶板上；

步骤(7)、不额外添加基质，置于通风橱中，自然挥发；

步骤(8)、样品干燥后，将所述靶板放置于基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)的靶托上，通过MALDI-TOF MS对所述微纳塑料样品直接进行质谱检测。