[发明专利]一种鳞翅目昆虫Hpx12基因及应用

说明书

本发明提出了一种鳞翅目昆虫Hpx12基因及应用，本发明的第一目的在于提供一种鳞翅目昆虫先天免疫反应调控基因Hpx12；第二目的在于提供所述的鳞翅目昆虫先天免疫反应调控基因Hpx12的克隆方法；第三目的在于提供所述的鳞翅目昆虫先天免疫反应调控基因Hpx12的应用。本发明将鳞翅目昆虫Hpx12基因被抑制表达后会抑制虫体的先天免疫反应，增加虫体对病菌的易感性，家蚕更容易感染BmNPV病毒，进而大大增加鳞翅目昆虫的死亡率。如果抑制鳞翅目昆虫Hpx12的表达，可实现害虫防治的目的。对于解决由于化学杀虫剂导致的生态恶化以及杀虫剂抗性等问题具有积极意义。

技术领域

本发明涉及属于基因工程技术领域，具体而言，涉及一种鳞翅目昆虫Hpx12基因及应用。

背景技术

鳞翅目包括蛾、蝶两类昆虫，属有翅亚纲、全变态类。全世界已知约20万种，中国已知约8000余种。该目为昆虫纲中仅次于鞘翅目的第2个大目。分布范围极广，以热带种类最为丰富。绝大多数种类的幼虫为害各类栽培植物，体形较大者常食尽叶片或钻蛀枝干。体形较小者往往卷叶、缀叶、结鞘、吐丝结网或钻入植物组织取食为害。有许多重要害虫，如桃小食心虫、苹果小卷叶蛾、棉铃虫、菜粉蝶、小菜蛾以及许多鳞翅目仓虫，如印度谷螟等。此外，著名的家蚕、柞蚕也属于本目昆虫。家蚕是一种以桑叶为食料的鳞翅目泌丝昆虫,蚕一生经过卵、幼虫、蛹、成虫个形态上和生理机能上完全不同的发育阶段。

昆虫是目前地球陆地上最繁盛的物种类群，是人类取之不尽的资源宝库。近年来，昆虫的免疫在其基础和应用研究方面受到极大关注，通过实验来研究与昆虫免疫相关的基因、信号等问题，对害虫防治、益虫防病、开发利用抗菌物、研究人类免疫机制等有着非常重要的现实意义。

Hpx12蛋白是一种多功能蛋白，具有过氧化物酶保守结构域，存在整合素结合位点，可与跨膜受体整合素结合，从而实现细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的黏附作用，使血细胞发挥吞噬和包被作用。昆虫纲动物中有关Hpx12蛋白的研究较少，家蚕中对该蛋白的功能研究更少。

发明内容

本发明正是基于上述技术问题至少之一，本发明将鳞翅目昆虫Hpx12基因被抑制表达后会抑制虫体的先天免疫反应，增加虫体对病菌的易感性，家蚕更容易感染BmNPV病毒，进而大大增加鳞翅目昆虫的死亡率。如果抑制鳞翅目昆虫Hpx12基因的表达，可实现害虫防治的目的。对于解决由于化学杀虫剂导致的生态恶化以及杀虫剂抗性等问题具有积极意义。

有鉴于此，本发明提出了一种鳞翅目昆虫Hpx12基因， Hpx12基因为鳞翅目昆虫先天免疫反应调控基因，核苷酸序列为SEQ ID No.1。

根据本发明第二个方向，提出了Hpx12基因表达抑制剂和/或活性抑制剂作为害虫防治靶点在鳞翅目昆虫中应用。

根据本发明第三个方向，提出了Hpx12基因编码的蛋白，蛋白的氨基酸序列为SEQID No.2。

根据本发明第四个方向，提出了Hpx12基因编码的蛋白在鳞翅目昆虫体内抑制Hpx12基因表达的ds RNA，降低鳞翅目昆虫先天免疫反应增加虫体对病菌的易感性中的应用。

进一步的， ds RNA序列为SEQ ID No.3。

进一步的，扩增ds RNA的引物序列为SEQ ID No.6- SEQ ID No.7；