[发明专利]双疾病模型小鼠的构建方法

说明书

本发明提供的双疾病模型小鼠的构建方法，将衣康酸二甲酯溶于双蒸水中，浓度为1.5mM，喂养小鼠，每2天更换新的水；喂养时间为15‑20天；在自发为1型糖尿病期间，每周强化饮水1次，时间为2天，最终获得双疾病模型小鼠。本发明模型应能容易检测其运动功能的损伤，包括运动迟缓、肌僵直和静止性震颤等PD的主要症状，成功率高，模型稳定时间长。

技术领域

本发明涉及动物模型构建技术领域，具体涉及双疾病模型小鼠的构建方法。

背景技术

糖尿病已严重威胁人类的生命和健康，是继肿瘤、心血管疾病之后对人类健康危害最严重的慢性非传染性疾病。随着我国社会经济的发展，人们生活水平的提高，饮食结构的变化，我国糖尿病发病率高达9.7%。2010年的调查研究表明，中国目前有超过9240万糖尿病患者，已成为全球糖尿病第一大国。糖尿病动物模型有助于进一步揭示糖尿病的发病机制及干预措施，及各类降血糖药物的测试筛选。动物模型可分为自发性及实验性之分，相较实验性模型而言，自发性模型推广性不强，成本高，而实验性性模型在世界范围内受到广泛欢迎。目前实验性糖尿病模型主要分为手术、化学物质损伤(四氧嘧啶/链脲佐菌素)、催肥、特殊膳食诱导、注射激素、病毒诱导等。手术造模对操作人员要求较高且易发生并发症，病毒诱导造模成功率不高，存在副作用而催肥和膳食诱导周期较长。1型糖尿病病人会伴发帕金森病，目前1型糖尿病合并帕金森病的小鼠模型尚未见报道。本申请便于给临床提供双疾病模型奠定基础。

发明内容

本发明的目的在于提供双疾病模型小鼠的构建方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

双疾病模型小鼠的构建方法：

（1）选取周龄为3w 的雌性NOD/LtJ Mice小鼠；

（2）衣康酸二甲酯溶于双蒸水中，配置含有1.5mM衣康酸二甲酯的双蒸水，喂养小鼠，每2天更换新的双蒸水；

（3）喂养时间为15-20天；

（4）在自发为1型糖尿病期间，每周强化饮水1次，时间为2天，最终获得双疾病模型小鼠。

所述强化饮水是指，重复给予添加含有1.5mM衣康酸二甲酯的双蒸水。

现有技术的缺点：

1：切除胰腺模型选择性不太好，会引起胰腺其他内分泌激素如生产抑素、胰高血糖素等的缺乏，在病因方面的研究也存在着不足；

2：化学物质直接损伤胰岛β细胞容易成功率不高，有一些副作用，目前比较少用。

3：近距离的毁损很难把握毁损的程度，模型的成功率很低，其危险性较高，对于试验人员和试验条件有着严格的要求。

4：机械损伤造模缺点是切断术后短时间内，损伤的程度不稳定。

本发明对比现有技术方案，具有以下优点：

1：多巴胺能神经元在出生时数量及形态正常，青年时期开始逐渐选择性地减少，减少量超过50％，且容易通过神经化学和神经生理学的方法检测到；

2：模型能容易检测其运动功能的损伤，包括运动迟缓、肌僵直和静止性震颤等PD的主要症状；

3：有相对较短的疾病周期（如数月），以使药物筛选得以经济、快速地进行，周期短，无需特殊仪器；

4：成功率高，模型稳定时间长，便于应用于一般实验室；

5：自发性疾病模型是动物自然发生疾病，与人类1型糖尿病有相似之处，可以很好的模仿人类糖尿病临床表现，是较理想的模型。

附图说明

图1 转录组生物信息分析步骤示意图。