[发明专利]一种定量检测ProAKAP4浓度的化学发光检测试剂盒的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种定量检测ProAKAP4浓度的化学发光检测试剂盒的制备方法及其应用，属于体外诊断试剂领域，ProAKAP4的浓度因精子而异，可以反映精子功能性活力以及精子如何保持活力直至受精点。本发明通过引入ProAKAP4，制备得到ProAKAP4化学发光检测试剂盒，该试剂盒的法学发光物底液显色，发光值与ProAKAP4抗体的含量呈负相关，通过全自动化学发光免疫分析仪可以快速定量检测精液中的ProAKAP4浓度，显著提升了对男性不育症的诊断的敏感性和特异性，对辅助生殖的结果具有较好预测价值。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂领域，具体涉及一种定量检测ProAKAP4浓度的化学发光检测试剂盒的制备方法及其应用。

背景技术

无精子症是指在射精过程中完全没有精子，它占男性不育病例的10-15%，占所有无精子症病例的60%，无精子症分为阻塞性无精子症OA和非阻塞性无精子症NOA，阻塞性无精子症OA和非阻塞性无精子症NOA的治疗对应不同的治疗方法。

目前临床上精子质量的评估主要采用：精液分析和性激素血清学检测。精液分析是最常用的检测方法，但是其分析结果受主观因素影响、精密度低、重复性差，对男性生育力评估和临床应用的价值有限；而性激素血清学检测如FSH、睾酮、抑制素B等则无法预测男性辅助生殖PESA/TESE的结果；并且以上两类检测方法都无法区分梗阻性无精症OA和非梗阻性无精症NOA，无法对症治疗，因此，临床上迫切需要新型的生物标记物，用于客观评估男性生育力，鉴别梗阻性无精症OA和非梗阻性无精症NOA，预测辅助生殖的结局。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够检测ProAKAP4浓度的化学发光检测试剂盒的制备方法及其应用。

本发明的技术方案是：一种定量检测ProAKAP4浓度的化学发光检测试剂盒的制备方法，所述试剂盒包括试剂R1、试剂R2，其中，试剂R1为含磁珠包被抗ProAKAP4抗体的磁珠包被物的0.01M PBS缓冲液；试剂R2为含吖啶酯标记的抗ProAKAP4抗体的0.01M PBS缓冲液。

进一步的技术方案，试剂R1、试剂R2为PH6.5-7.5的含有表面活性剂、防腐剂及蛋白的缓冲液。

进一步的技术方案，试剂R1的PH值为7.2，内含0.1 %吐温20 (v/v)、5%牛血清白蛋白（w/v)、 0.5%Proclin300 (v/v)。

进一步的技术方案，试剂R2的PH值为7.2，内含0.1%吐温20(v/v)、5%牛血清白蛋白（w/v)、0.5% Proclin300 (v/v)。

进一步的技术方案，还包括化学发光底物液A液和B液，其中，A液为预激发液，B液为激发液。

进一步的技术方案，预激发液为过氧化氢溶液，激发液为氢氧化钠溶液。

进一步的技术方案，通过定量检测ProAKAP4浓度的化学发光检测试剂盒的制备方法制备所得的试剂盒的在精液ProAKAP4浓度检测中的应用。

本发明的有益效果：