[发明专利]一组用于鉴定志贺菌属相关菌种的引物组合、试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 202110090852.4 | 申请日： | 2021-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN112646910A | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 吴森;王绪敏;方向东;单广乐 | 申请（专利权）人： | 中国科学院北京基因组研究所（国家生物信息中心） |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 尉月丽 |
| 地址： | 100101 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一组 用于 鉴定 志贺菌 属相 菌种 引物 组合 试剂盒 检测 方法 | ||
1.一组用于鉴定志贺菌属相关菌种的引物组合，其特征在于，所述的引物组合包括以下核苷酸序列：检测Shigella boydiistr 80的引物对由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的两条核苷酸序列组成；检测Shigella boydiistrATCC9210的引物对由SEQ ID NO:3和SEQID NO:4所示的两条核苷酸序列组成；所述的引物组合中SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:4的浓度比为1:1:1:1。
2.权利要求1所述的引物组合在制备志贺菌属相关菌种的检测试剂盒和/或制剂中的应用。
3.一种志贺菌属相关菌种的检测试剂盒，其特征在于，所述的检测试剂盒包括权利要求1所述的引物组合。
4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的检测试剂盒还包括PCR试剂，所述的PCR试剂包括MgSO4、dNTPs、10×KOD-Plus-Neo Buffer和KOD-Plus-Neo。
5.一种志贺菌属相关菌种的检测方法，其特征在于，是采用权利要求3或4所述的检测试剂盒进行PCR检测。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述的PCR检测的反应体系包括：10ng/μL待测样品基因组DNA 2μL，10μM引物各0.75μL，25mMMgSO43μL，2mMdNTPs5μL，10×KOD-Plus-Neo Buffer 5μL，KOD-Plus-Neo 1μL，ddH2O补至50μL。
7.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述的PCR检测的反应程序为：94℃预变性90sec；98℃变性10sec，50℃退火30sec，68℃延伸30sec，25个循环；68℃延伸10min。
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