[发明专利]一种调控Treg细胞活化的方法

说明书

本发明属于生物医药技术领域，公开了一种调控Treg细胞活化的方法，研究结果显示MLL1并不影响胸腺T细胞的正常发育；并且MLL1的缺失并不影响常规T细胞的活化以及IFN‑γ的分泌水平，但是特异性的在Treg细胞中敲除MLL1影响了Treg细胞的活化，造成了小鼠体内明显的免疫激活；之后也在实验性变态反应脑脊髓炎模型(EAE)中观测到了这一点，MLL1KO小鼠不能有效的限制病程的进展，且分析CNS细胞Treg比例降低，暗示其不能有效的活化迁移，抑制自身免疫疾病的发展。上述研究发现推动我们进一步认识Treg细胞发挥免疫抑制作用的分子机制，为抗肿瘤免疫提供新的治疗策略。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，更具体地，涉及一种调控Treg细胞活化的方法。

背景技术

调节性T细胞是具有免疫抑制活性的CD4阳性T细胞亚群，虽然调节性T细胞数量较少，一般只占CD4阳性细胞的10％左右，但其对于维持机体的免疫稳态和自身免疫耐受至关重要。调节性T细胞完全缺陷会导致致死性的免疫系统失调，引起IPEX(免疫调节异常、多发内分泌病、肠病和X连锁遗传病)综合征。但是，Treg的过量也会损害有益的免疫应答，如癌症病人肿瘤局部组织中的Treg细胞数量显著增加，从而抑制机体的抗肿瘤免疫反应。近些年的研究已经表明，多种疾病进程中都有Treg细胞的数量、分布或者功能的异常，因此Treg细胞调控机制方面的研究具有非常重要理论意义和潜在临床应用前景。

表观遗传调控通过将基因座组织成转录活化或沉默状态，从而改变转录因子和RNA聚合酶等进入和结合基因启动子和增强子的能力，在控制细胞命运走向中发挥着非常作用。表观遗传调控涉及到多种DNA和组蛋白的修饰，如甲基化、乙酰化、磷酸化等多种方式，其中组蛋白甲基化是表观修饰的重要一环。组蛋白甲基化作为染色质结构的一种修饰，可以改变核小体的特性，影响了它与其他蛋白的相互作用，尤其是与基因转录过程相关的关键蛋白。组蛋白甲基化由组蛋白转移酶转移1-3个甲基到目标氨基酸残基上实现，H3K4位点的二或三甲基化，H3K79位点的三甲基化与转录活化相关，H3K9二或三甲基化，H4K20三甲基化与转录抑制相关。

MLL家族是目前研究最为深入的一类甲基转移酶，因其基因易位重排所引起的混合系白血病而得名，在哺乳类中共存在3对结构相类似的成员，所有MLL family都包含1个SET结构域。SET结构域是目前发现的多数组蛋白甲基转移酶都具有的保守催化结构域。MLL的SET结构域自身的甲基活性都很低，正常的生理活性发挥还有赖于结合自身一系列的调节蛋白，包括WDR5、RbBp5、Ash2L等。可通过抑制这些调节蛋白与MLL的结合，来调控MLL的功能。尽管MLL family成员在结构上有一定的相似性并都有SET结构域，但是每个MLL都有其独特的功能。

Treg细胞发育活化分化过程中需要进行多种表观遗传精确调控。Treg细胞有自己独特的表观遗传修饰，Sakaguchi等发现在Treg特征性的基因处都有高度组蛋白的甲基化和乙酰化，形成染色质结构高度开放的super-enhancer。最新研究表明MLL家族中MLL4作为组蛋白H3K4甲基化复合物的一个重要成员，可通过与Foxp3上的增强子直接结合或形成染色质环与其远端增强子结合进行组蛋白甲基化修饰，调控Foxp3表达。有意思的是该研究还发现Foxp3Cre-Mll4^flox/flox小鼠没有明显的表型，MLL4在Treg发育成熟后并不影响Treg功能。可能会有其他的MLL成员会在Treg活化和分化中发挥重要作用。

MLL 1是目前了解比较清楚的MLL成员，在造血干细胞中发挥重要作用，MLL1基因敲除的小鼠也表现出造血异常而产生致死性的表型，MLL1蛋白对造血干细胞在生长发育的影响很可能是通过Hox基因的调控起作用。MLL1功能并不仅限于干细胞，如MLL 1的缺失造成B细胞的发育及存活的缺陷，但是其在T细胞中的相关研究还很少，仅有文献研究表明MLL1蛋白可以结合在GATA3以及Th2型细胞因子基因座特异性位点上维持记忆性Th2细胞的免疫应答。

发明内容