[发明专利]一种伯克氏菌及其在防治三七根腐病主要病原菌中的应用

说明书

本发明提供了一种伯克氏菌(Burkholderiaspp.)B36,所述菌株对三七主要根腐病菌锈腐病菌有较强的抑制活性，对三七主要的皂苷类自毒物质(R1、Rg1、Re、Rb1和Rd)均存在较明显的降解，尤其是对皂苷Rb1和Rd具有显著的降解活性。具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种菌株，具体涉及一种伯克氏菌株及其在防治三七根腐病主要病原菌中的应用。

背景技术

三七是云南文山地区主要的经济作物，性喜温暖阴湿，其独特的生长环境容易诱发多种土传病害。由于三七神奇的药用功效，全球对三七及其相关产品的需求日益增加，而可供种植三七的区域并不多，因此大多数地区采取三七连作的种植方式。随着三七种植年限的增加，土传病害的种类、发病面积及严重程度逐年增加，严重损害三七的产量和质量，其中最主要的病害为根腐病。

根腐病是由于土壤中微生物失调，大量病原性和真菌侵染三七植株根部导致的，土壤中微生物失调是导致三七连作障碍的一个重要因素，目前常用的治理方法主要是施用杀菌剂，但是效果越来越不理想，而采用高效熏蒸剂进行土壤灭生处理，然后再补充益生菌剂调整微生物区系使土壤活化和健化的方法则成本较高，效果也不理想。

伯克氏菌是一种假单胞菌，广泛分布于自然环境中，不同的菌株表型相同，但是基因型不同，有些类型的伯克氏菌在农业上可用作生物降解、生物控制及促进植物生长之根圈微生物，但还有一些是植物致病菌甚至是人体条件致病菌，而且由于伯克氏菌具有较强的抗生素抗药性及较高的运动性，因此，在农业上应用伯克氏菌具有一定的潜在风险，在菌株的选择上需得非常谨慎。中国专利201010290583.8公开了一种水稻根围伯克氏菌，这个菌株在防治水稻纹枯病方面有非常好的效果，但是用这个菌株的菌悬液接种烟叶时，会在24小时内导致典型的过敏反应，因此，如果要利用伯克氏菌解决不同作物的土传病害，如何分离纯化出最合适的伯克氏菌株就很重要。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种伯克氏菌株及其在防治三七根腐病主要病原菌中的应用方法。

本发明提供一种伯克氏菌菌株(Burkholderia spp.)B36，保藏编号为CGMCCNo.21179；保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101；保藏日期为2020年11月16日。

本发明所提供的伯克氏菌菌株B36为从健康三七根际土壤中分离得到，对其形态进行鉴定，具体结果如下：该菌为革兰氏阴性菌，无芽孢短杆状、菌落黄色、表面光滑隆起、边缘不规则。

本发明还提供了一种采用上述伯克氏菌菌株B36制备的菌悬液及其应用，更为具体地，所述应用为可用于抑制三七根腐病菌、降解三七主要的皂苷类毒性物质以及缓解土壤连作效应。

本发明的有益效果如下：

本发明提供的伯克氏菌B36在抗菌实验中能有效地拮抗三七根腐病主要病菌，如茄腐镰刀菌和锈腐病菌，并且对三七皂苷类自毒物质具有显著的降解作用，尤其对皂苷Rb1的降解活性最高，可达100％；此外，不同浓度的三七粗皂苷均未对菌株生长产生抑制，其中高浓度皂苷1.0g/L能明显促进菌株生长。说明伯克氏菌B36能耐受较高浓度的粗皂苷，并且三七粗皂苷能促进菌株进行营养生长，在三七根系中占据更有利的生态位。粗皂苷会促进伯克氏菌B36生物膜的形成，加强其在根部的定殖。伯克氏菌B36对林下土中三七出苗具有一定的促进作用，尤其当土壤中存在自毒物质和根腐病菌(茄腐镰刀菌和锈腐病菌)时，可以明显促进三七的出苗，促进率分别为15.79％、60.0％和42.86％。

附图说明

图1为本实施例提供的伯克氏菌(Burkholderia spp.)B36菌落图。

图2为本实施例提供的伯克氏菌(Burkholderia spp.)B36革兰氏染色图。

图3不同浓度三七粗皂苷对伯克氏菌B36生长的影响。