[发明专利]一种多功能微环境保护外泌体水凝胶及其制备方法和应用有效
申请号: | 202110077305.2 | 申请日: | 2021-01-20 |
公开(公告)号: | CN112870228B | 公开(公告)日: | 2023-01-24 |
发明(设计)人: | 崔文国;林嘉盈;王臻;俞小华 | 申请(专利权)人: | 杭州贤石生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/28;A61K9/06;A61K47/20;A61K47/02;A61P15/00;A61P15/08 |
代理公司: | 成都帝鹏知识产权代理事务所(普通合伙) 51265 | 代理人: | 李华 |
地址: | 310000 浙江省杭州市萧*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多功能 环境保护 外泌体水 凝胶 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种多功能微环境保护外泌体水凝胶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)从动物组织样本中分离获得脂肪来源的间充质干细胞,进行消化后获取原代细胞进行继代培养,取继代培养后的脂肪干细胞备用;
(2)取脂肪来源的间充质干细胞,将其置于DMEM培养基中,于37℃下培养2周,然后采用超速离心法提取间充质干细胞释放的外泌体,所述超速离心法的步骤为:将收集的培养基上清800×g离心5分钟,2000×g二次离心10分钟,过滤上清,再于4 ℃下,100000×g离心90分钟;将获得的外泌体稀释至10 μg/mL后进行使用;
(3)取巯基-聚乙二醇溶解于步骤(2)的脂肪干细胞外泌体中得到混合物,所述巯基-聚乙二醇的分子量范围为1000-2000 Da,巯基-聚乙二醇与脂肪干细胞外泌体的质量体积比为30mg:100 μL;然后将浓度为0.1mol/L的AgNO3水溶液采用脂肪干细胞外泌体进行稀释,所述AgNO3水溶液与脂肪干细胞外泌体的体积比为3:4,再加入到上述混合物中,数秒钟后形成透明的多功能微环境保护外泌体水凝胶。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述DMEM培养基中含有10%的胎牛血清和1 %的链霉素或青霉素。
3.一种如权利要求1或2所述方法制备得到的多功能微环境保护外泌体水凝胶。
4.一种如权利要求3所述的多功能微环境保护外泌体水凝胶的应用,其特征在于,是将其用于制备促进子宫内膜再生和生育能力恢复方面的药物。
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