[发明专利]枯草芽孢杆菌及高产吲哚乙酸、高芽孢形成率的发酵方法

权利要求书

1.一种高产吲哚乙酸、高芽孢形成率的发酵方法，其特征在于，采用枯草芽孢杆菌8-32进行发酵，包括如下步骤：

(1)摇瓶培养：

将枯草芽孢杆菌8-32接种于摇瓶培养基中培养，得到摇瓶种子液；

其中，培养温度为30～37℃，转速为150～200r/min，培养时间为18～24h；

(2)种子罐发酵：

将摇瓶种子液按体积比5～10％接种于种子培养基中发酵，得到种子液；

其中，发酵温度为30～37℃，转速为150～300r/min，DO值为30～80％，罐压为0.03～0.05Mpa，发酵时间为16～24h；

(3)发酵罐发酵：

将种子液按体积比5～10％接种于发酵培养基中发酵；

其中，发酵温度为30～37℃，转速为150～300r/min，DO值为30～80％，罐压为0.03～0.05Mpa，发酵时间为16～18h；之后补料发酵6～12h得到发酵液；

(4)发酵后处理：

将发酵液加热至50～80℃，保持15～60min，冷却至室温；或将发酵液pH值调整至5.5～6.0即可；

所述枯草芽孢杆菌8-32，于2020年9月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.20824。

2.如权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，步骤(3)中所述补料发酵的具体操作为：

向发酵罐中添加葡萄糖使其质量浓度维持在1％直至发酵结束；或向发酵罐中添加氨水使

pH值维持在7.5～8.5直至发酵结束。

3.如权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，步骤(1)中所述摇瓶培养基和步骤(2)中

所述种子培养基均由如下质量百分比的组分组成：碳源2～5％、氮源2～5％、组分A0.01～0.03％、硫酸镁0.01～0.03％、氯化钙0.01～0.03％，余量为水；

所述组分A为磷酸二氢钾、氯化铁或氯化钠中任意一种。

4.如权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，步骤(3)中所述发酵培养基由如下质量百分比的组分组成：碳源2～5％、氮源2～5％、组分A 0.01～0.03％、硫酸镁0.01～0.03％、氯化钙0.01～0.03％、色氨酸0.2～0.5％，余量为水；

所述组分A为磷酸二氢钾、氯化铁或氯化钠中任意一种。

5.如权利要求3或4任一所述的发酵方法，其特征在于，所述碳源为玉米粉、酵母浸粉、麦芽糖和葡萄糖中的一种或多种的混合。

6.如权利要求3或4任一所述的发酵方法，其特征在于，所述氮源为黄豆饼粉、蛋白胨和牛肉膏中的一种或多种的混合。