[发明专利]一种促进堆肥腐熟真菌、筛选方法及应用

说明书

本发明公开了一种促进堆肥腐熟真菌、筛选方法及应用，涉及生物技术领域，其保藏编号是：CGMCC No.21024，促进堆肥腐熟真菌的筛选方法，包括下列步骤：S1：取腐熟鸡粪与灭菌水按重量份数比1:9加入到三角瓶中，吸取上清液并用无菌水稀释成10^‑5浓度梯度的菌悬液；S2：分别吸取0.1mL不同浓度菌悬液涂布于马丁氏培养基上培养7d，培育温度为25℃，挑取形态各异的真菌点接在改良马丁培养基上进行纯化；S3：接到改良马丁培养基制备纯化真菌菌悬液，放置于25℃恒温培养箱中培养7d；S4：将鸡粪样品与去离子水按重量份数比1：9在三角瓶中混合，通过计算种子的发芽指数筛选出促进堆肥腐熟真菌。能够加快腐熟进程、缩短堆肥周期。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体的说是涉及一种促进堆肥腐熟真菌、筛选方法及应用。

背景技术

好氧堆肥是依靠专性和兼性好氧微生物作用降解有机物的生化过程，将需要堆腐的有机料与辅料按一定的比例混合，在合适的水分、通气条件下，使微生物繁殖并降解有机质，从而产生高温，杀死其中的病原菌及杂草种子，使有机物达到稳定化。好氧堆肥是畜禽废弃物资源化、无害化处理的重要途径，在堆肥过程中微生物将易降解的有机物分解后吸收转化成自身细胞物质，并将不易降解的有机物矿化再腐殖化，其中矿化作用和腐殖化作用主要对应堆肥的一次发酵和二次发酵两个阶段。一次发酵指堆肥升温期和高温期，然后随着温度不断降低，堆肥进入二次发酵阶段，此阶段微生物进一步分解剩余的有机物，并将形成的矿物质腐殖化。

研究发现，我国畜禽粪便产生量增速放缓，总量逐渐趋于稳定，目前每年产生的养殖废弃物可达38亿吨，但综合利用率不到60%。那些未能资源化利用或未经过无害化处理的废弃物不仅严重污染环境，而且在一定程度上危害人畜健康。因此，如何提高畜禽养殖废弃物的综合利用率已成为当前亟待解决的问题。好氧堆肥是畜禽废弃物无害化处理和资源化利用的重要方式，然而在实际生产中，堆肥周期过长、场地有限以及发酵不充分等问题严重限制了堆肥效率。

接种特异性外源微生物是加快腐熟进程、缩短堆肥周期的一种有效方法，但是大多数外源微生物都是为了促进堆肥升温、提高一次发酵的效率和品质，目前市场上缺乏促进堆肥二次发酵的微生物菌剂。

发明内容

本发明为了解决上述技术问题，而提供一种促进堆肥腐熟真菌、筛选方法及应用，筛选出一种促进堆肥腐熟真菌，能够加快腐熟进程、缩短堆肥周期。

本发明通过下述技术方案实现：

一种促进堆肥腐熟真菌，该菌株已于2020年12月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其保藏编号是：CGMCC No.21024，其生物学分类命名为：链格孢（Alternaria sp.） 。其保藏编号是：CGMCCNo.21024。

促进堆肥腐熟真菌的筛选方法，包括下列步骤：

S1：取腐熟鸡粪与灭菌水按重量份数比1:9加入到三角瓶中，室温下放置于摇床中振荡30 min，取出后静置5 min，然后吸取上清液并用无菌水稀释成10^-5浓度梯度的菌悬液；

S2：分别吸取0.1 mL不同浓度菌悬液涂布于马丁氏培养基上培养7 d，培育温度为25℃，挑取形态各异的真菌点接在改良马丁培养基上进行纯化，纯化后得到纯化真菌；

S3：将纯化真菌分别接到改良马丁培养基制备纯化真菌菌悬液，将纯化真菌菌悬液按10%的接种量接入含有50g鸡粪的三角瓶，放置于25℃恒温培养箱中培养7d，得到鸡粪样品；

S4：将鸡粪样品与去离子水按重量份数比1：9在三角瓶中混合，放置于摇床中震荡浸提1 h后过滤，吸取该滤液10 mL，加到铺有滤纸的培养皿内，培养皿点播小麦种子，通过计算种子的发芽指数筛选出促进堆肥腐熟真菌。

进一步，所述步骤S2中马丁氏培养基的制备方法，包括下列步骤：