[发明专利]检测可用于指导卡马西平用药的HLA-B*1502分型的引物和方法

权利要求书

1.一对检测指导卡马西平用药的HLA-B*1502分型的引物，其特征在于，包括：

特异性扩增HLA-B*1502分型的引物，其碱基序列为：

HLA-B*1502-F：TGTAAAACGACGGCCAGTGAACACACAGATCTCCAAGACCA

HLA-B*1502-R：AACAGCTATGACCATGCAGCCATACATCCTCTGGATGA。

2.如权利要求1所述的引物，其特征在于，还包括测序引物，其碱基序列为：

M13 F：TGTAAAACGACGGCCAGT

M13 R：AACAGCTATGACCATG。

3.如权利要求1所述的引物，其特征在于，还包括检测内参基因的引物actin-F和actin-R，所述检测内参基因的碱基序列为：

actin-F：CTAACTGCGCGTGCGTTCT

actin-R：AGTCCTTAGGCCGCCAGGGG。

4.如权利要求1所述的引物，其特征在于，所述正、反向引物在体系内的浓度均为0.1875uM。

5.如权利要求3所述的引物，其特征在于，所述内参基因的引物的使用浓度比为：actin-F:actin-R＝1:1。

6.一种检测指导卡马西平用药的HLA B1502分型的方法，包括以下步骤：

(1)抽提外周血或骨髓中的基因组DNA；

(2)利用扩增引物HLA-B*1502-F/HLA-B*1502-R和actin-F/actin-R对(1)中的DNA进行扩增，当内参actin-F/actin-R扩增有目的条带，而HLA-B*1502-F/HLA-B*1502-R扩增无目的条带时，可确定样本HLA-B*1502分型为阴性，当两对引物的扩增都有目的条带时，需对样本进行测序检测；

(3)利用测序引物M13-F与M13-R对(2)中的扩增产物进行测序；

(4)将(3)中的测序结果与野生型HLA-B*1502等位基因序列进行比较，与HLA-B*1502等位基因序列完全相符，则可确定样本HLA-B*1502分型阳性，否则为阴性；

其中PCR扩增引物为：

HLA-B*1502-F：TGTAAAACGACGGCCAGTGAACACACAGATCTCCAAGACCA

HLA-B*1502-R：AACAGCTATGACCATGCAGCCATACATCCTCTGGATGA。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，扩增体系内模板DNA浓度最低为0.25ng/uL。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，测序引物碱基序列为：

M13 F：TGTAAAACGACGGCCAGT

M13 R：AACAGCTATGACCATG。