[发明专利]检测单糖的方法

说明书

本发明公开了一种检测单糖的方法。该方法包括：将待测样本进行提取处理，以便得到提取液；将所述提取液进行高效液相色谱‑串联质谱检测，以便获得所述单糖的含量，其中，所述高效液相色谱的色谱柱为Acquity BEH Amide色谱柱，规格为150mm×2.1mm，1.7μm。该方法利用高效液相色谱‑串联质谱进行检测，并且，应用Acquity BEH Amide色谱柱对糖类同分异构体有较好的分离，检测的灵敏度高，操作简单、分析速度快、结果准确性高。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体地，涉及检测单糖的方法。

背景技术

多糖具有广泛的生理活性，如：免疫调节作用、抗肿瘤、降血脂、抗衰老等作用。活性多糖组成往往比较复杂，对其进行单糖组成分析，对于进一步确定其结构和多糖质量，具有重要意义。多糖的单糖组成测定有多种方法，如薄层色谱法、气相色谱法、高效毛细管电泳法、柱前衍生-高效液相色谱法等，但上述方法检测的单糖种类少，准确度和灵敏度相对较低。

由此，单糖的检测方法有待改进。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种检测单糖的方法，该方法快速、简单、灵敏度高。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种检测单糖的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将待测样本进行提取处理，以便得到提取液；将所述提取液进行高效液相色谱-串联质谱检测，以便获得所述单糖的含量，其中，所述高效液相色谱的色谱柱为Acquity BEH Amide色谱柱，规格为150mm×2.1mm，1.7μm。

根据本发明实施例的检测单糖的方法，利用高效液相色谱-串联质谱进行检测，并且，应用Acquity BEH Amide色谱柱对糖类同分异构体有较好的分离，检测的灵敏度高，操作简单、分析速度快、结果准确性高。

另外，根据本发明上述实施例的检测单糖的方法，还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的实施例，所述高效液相色谱为Acquity超高效液相色谱。

根据本发明的实施例，所述质谱为三重四级杆质谱。

根据本发明的实施例，所述高效液相色谱的流动相为：A：10mM甲酸铵溶液，B：含10mM甲酸铵-乙腈溶液。

根据本发明的实施例，梯度洗脱程序：10～20％A(0～7.5min)；20～40％A(7.5～9.5min)；40～10％A(9.5～9.51min)；10％A(9.51～13min)。

根据本发明的实施例，所述高效液相色谱的色谱条件为：流速0.2mL/min；进样量5μL；柱温30℃。

根据本发明的实施例，所述质谱的质谱条件：电喷雾离子(ESI)源；离子源温度500℃；扫描方式：负离子模式；雾化气GS1压力55℃；辅助气GS2压力60℃；离子源喷雾电压：-5.5kV；入口电压：-10V；出口电压：-13V。

根据本发明的实施例，所述单糖包括甘露醇、岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、核糖、果糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸和蔗糖。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1显示了根据本发明一个实施例的半乳糖、甘露糖、葡萄糖、果糖一组同分异构体在不同固定相中的色谱示意图，其中，A为XBridge Amide色谱柱；B为Acquity BEH HILIC色谱柱；C为Inertsustain NH₂色谱柱；D为Acquity BEH色谱柱；