[发明专利]一种通过幼胚挽救技术获得茉莉花种间杂交后代的方法

说明书

本发明提供了一种通过幼胚挽救技术获得茉莉花种间杂交后代的方法，属于现代植物育种技术领域。本发明包括以下步骤：（1）人工杂交授粉；（2）幼胚消毒与预处理；（3）幼胚挽救培养；（4）增殖扩繁培养；（5）生根培养；（6）炼苗移栽。本发明以毛茉莉和菊花茉莉的杂交胚为试验材料，通过选择合适的胚龄、预处理方法、萌发培养基以及离体培养条件等，杂交胚经幼胚挽救离体培养后可以被诱导萌发，然后经过增殖扩繁、生根、炼苗移栽后可获得大量杂交后代。本发明克服了茉莉花种间杂交受精后障碍，提高了杂交胚的萌发率，加快了茉莉花杂交育种进程。

技术领域

本发明涉及一种通过幼胚挽救技术获得茉莉花种间杂交后代的方法，属于现代植物育种技术领域。

背景技术

茉莉花（Jasminum sambac(L.)Atiton）为木樨科素馨属（也叫茉莉属），常绿小灌木或藤本状灌木，原产于印度、巴基斯坦等地，多分布于热带，亚热带和温带地区。我国以江苏、浙江、福建、台湾、 广东、四川、云南分布最为广泛。茉莉花在我国已有约2000年的栽培历史，我国也是世界上茉莉花产量最多的国家，年产量占世界茉莉花总产量的50%以上。茉莉花叶色翠绿，花色洁白，清香四溢，是常见庭园及盆栽观赏芳香花卉，也是重要的花茶和香精原料。中医学认为茉莉花性味辛甘温，具有理气、开郁、辟秽、和中之功效，食之有清热明目，治高血压等作用，还可用于治疗腹胀腹泻、结膜炎、皮炎、疮毒等。茉莉花已广泛应用于盆栽观赏、园林绿化、花茶窨制、香料生产等方面，是我国既具观赏价值又具经济价值的重要园林花卉。

茉莉花的品种较多，目前仅我国就有60多个，其中主要的栽培品种根据其花瓣的不同可分为单瓣、双瓣和重瓣（多瓣）3种类型。其中单瓣茉莉和重瓣茉莉总体上生态适应性较弱，抗逆性和产花量较差，因此目前生产上使用的主要为双瓣茉莉。但双瓣茉莉经过多年的无性繁殖和长期使用，会出现品种性退化，导致其抗性和产花量均降低。因此，开展茉莉花种质创新和品种改良研究具有重要意义。

远缘杂交是指种以上分类单位生物类型之间的杂交，包括同属植物的种间杂交、不同属植物的属间杂交以及更高分类阶元物种之间的杂交，如亚族间杂交等。远缘杂交是植物种质创新和品种改良的重要途径之一，远缘杂交后代有明显的杂种优势，通过远缘杂交获得抗逆性强、观赏价值高的植物新品种是育种家追求的目标。但是，众多育种实践表明，由于各物种间存在不同程度的生殖隔离，使得远缘杂交在很多情况下都难以成功。远缘杂交障碍可划分为受精前障碍和受精后障碍，主要包括亲本的不育性、亲本的不可交配性或不亲和性、杂种胚与胚乳组织发育的不协调性以及由于杂种胚的降解或败育或杂种的不育而引起的杂种崩溃。

远缘杂交受精后障碍可通过幼胚挽救技术克服。幼胚挽救技术是在败育前取出幼胚（或胚珠）在适宜环境下培养，降低败育数，促进萌发，从而获得杂种的一种育种技术。幼胚挽救技术是一项技术难度比较大、各项操作规则要求都比较严格的工作，其工作过程中的每一个环节均受到很多因素的影响，这些因素的种类和取值的范围都会直接影响到培养的效果，因此，对这些因素的优化是植物幼胚挽救技术的永恒话题。根据现有的研究，胚挽救的主要影响因素包括以下几点：（1）亲本选择。（2）接种时间。胚的发育包括异养和自养两个阶段，第一阶段的胚需要从外界吸收营养物质及生长调节物质才能保障继续生长发育，当胚发育至心形胚晚期，转为自养阶段。因此，接种时间不当会影响胚挽救的结果，接种时间早，胚珠内合子胚发育不完全，培养难度大；时间晚，大部分合子胚开始败育或已完全败育，失去培养价值。（3）培养基。适宜培养基是促成幼胚发育成熟的关键环节之一。不同发育时期、不同物种需要的培养基各不相同。因此在培养过程需要多次重复试验以确定适合的培养基，以提高胚挽救成功率。（4）培养方式及条件。

幼胚挽救技术在新种质创制和新品种培育中得到迅猛发展，加快了植物育种进程，目前己在大田作物、果树、蔬菜等远缘杂交育种领域广泛应用。而国内外有关茉莉花杂交幼胚挽救的研究尚未见相关报道。

发明内容