[发明专利]靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法在审
申请号: | 202110059215.0 | 申请日: | 2021-01-18 |
公开(公告)号: | CN112680438A | 公开(公告)日: | 2021-04-20 |
发明(设计)人: | 李东浩;刘璐;崔嘉轩 | 申请(专利权)人: | 延边大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07K1/26 |
代理公司: | 延边科友专利商标代理有限公司 22104 | 代理人: | 柳明哲 |
地址: | 133000 吉林省延*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 凝胶电泳 分离 尺度 物质 方法 | ||
1.一种靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法,包括如下步骤:
①提供靶式凝胶分离装置槽,将一定浓度的凝胶放入制备好的圆盘配胶板中,插入样品槽模具,凝胶自然冷却形成圆盘型凝胶,然后拔掉样品槽模具;
②在制备好的圆盘型凝胶中放置外环电极和中心电极,电极与电源连接,使圆盘凝胶中形成非匀强电场;
③加入电泳缓冲溶液后,进行上样并电泳分离,微纳尺度物质在碱性缓冲溶液条件下表面带负电荷,在凝胶中向中心正电极运动;
④调节所施加的电参数调控目标物的泳动速度及路径,较小分子量的目标分子将率先到达中心电极附近进行浓缩,较大分子量的目标分子将最后到达中心电极处浓缩;调节凝胶浓度调控分离条带展宽;调节加电时间实现样品组分分步在圆心处进行浓缩;调节缓冲溶液浓度来调控离子强度控制目标分子的带电量及运动速度。
2.根据权利要求1所述的一种靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法,其特征是所述的非均匀电场,在圆盘凝胶圆心处的电场强度最大。
3.根据权利要求1所述的一种靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法,其特征是所述的圆盘配胶板的直径范围在1 cm-30 cm。
4.根据权利要求1所述的一种靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法,其特征是所述的外环电极和中心电极材质为铂、银或铜材质。
5.根据权利要求1所述的一种靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法,其特征是所述的凝胶为琼脂糖凝胶,凝胶浓度在0.5-3.0%。
6.根据权利要求1所述的一种靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法,其特征是所述的所述的样品槽模具是圆环形状样品槽模具或者是锯齿形样品槽模具。
7.根据权利要求1所述的一种靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法,其特征是所述的电参数为:电源为直流电源或交流电源,直流电压1-200 V,交流电压0-200V、频率0-100Hz、Duty值1-99%、时间1-90 min。
8.根据权利要求1所述的一种靶式凝胶电泳分离微纳尺度物质的方法,其特征是所述的不同的微纳尺度物质目标分子在一定的电泳条件下,在非均匀电场条件下分离并形成靶式分布条带,随着电泳时间增加将先后到达中心电极附近进行浓缩。
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